Langsung ke isi
AML12
Tisu
Hati
Sinonim
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

AML12

Cell line · Nomor produk 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Sel AML12, juga dikenal sebagai sel Alpha Mouse Liver 12, adalah garis sel epitel non-tumorigenik yang berasal dari hati tikus transgenik. Sel-sel ini pada awalnya dikembangkan untuk menyediakan model in vitro yang sesuai untuk mempelajari fungsi hepatosit dan biologi hati tikus dewasa. Sel AML12 mengekspresikan karakteristik khas hepatosit yang terdiferensiasi, termasuk produksi albumin, transferin, dan protein spesifik hati lainnya, menjadikannya sumber daya yang tak ternilai untuk penelitian di bidang toksikologi, metabolisme obat, dan penyakit hati.

Garis sel dibuat dari hepatosit yang diisolasi dari tikus yang mengandung transgen untuk human transforming growth factor alpha (TGF-alpha), di bawah kendali promotor metallothionein-I tikus. Perubahan genetik ini berkontribusi pada pengabadian sel tanpa mengganggu keadaan diferensiasinya. Sel AML12 mempertahankan fenotipe dan kariotipe yang stabil dalam kondisi kultur sel standar, yang mencakup persyaratan unik untuk deksametason dan insulin-transferin-selenium dalam media pertumbuhan untuk meningkatkan proliferasi dan mempertahankan fungsi spesifik hepatosit.

Tisu
Hati
Aplikasi
kultur sel 3D, Skrining dengan hasil tinggi, Toksikologi
Sinonim
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel
Jenis sel
Hepatosit

04Pengidentifikasi

Referensi
AML12 (Nomor katalog Cytion 300643)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Ekspresi dan kerentanan

Produk
Sel-sel tersebut mengekspresikan TGF alfa manusia tingkat tinggi dan TGF alfa tikus tingkat rendah.

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Suplemen media dengan 10% FBS, 10 mikrogram / mL insulin, 5,5 mikrogram / mL transferin, 5 ng / mL selenium, 40 ng / mL deksametason
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
CD-1 MT42 transgenik
Usia donor
3 bulan