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BALB/3T3 clone A31
Tissu
Embryon
Synonymes
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Documents

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Référence du produit 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00hors taxes et frais de port
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01Informations générales

Description

Le clone BALB/3T3 A31, une lignée cellulaire de fibroblastes développée par S.A. Aaronson et G.T. Todaro en 1968, provient d'embryons de souris BALB/c désagrégés âgés de 14 à 17 jours. Cette lignée cellulaire est un outil fondamental dans l'étude de la biologie cellulaire, particulièrement connue pour sa capacité à supporter la croissance de virus et sa susceptibilité aux transformations oncogéniques. De manière caractéristique, ces cellules sont des fibroblastes fusiformes qui peuvent agir comme des cellules mésenchymateuses multipotentielles. Elles ont la capacité de se différencier en divers tissus en fonction des influences microenvironnementales ou des conditions de culture, ce qui souligne leur polyvalence dans les modèles expérimentaux.

Les pratiques de culture cellulaire pour le clone BALB/3T3 A31 impliquent des transferts répétés avant d'atteindre la confluence afin de minimiser le contact cellule-cellule, favorisant des caractéristiques telles que l'inhibition de la division cellulaire par contact, la croissance à haute dilution et une faible densité de saturation. Ces cellules présentent un caryotype varié avec un nombre modal de 78 chromosomes, allant de 62 à 109, avec une prédominance de chromosomes télocentriques ou acrocentriques. Malgré des rapports occasionnels d'instabilité cytogénétique, les cellules BALB/3T3 A31 conservent un statut non tumorigène, bien qu'elles présentent des propriétés tumorigènes lorsqu'elles sont cultivées dans des milieux semi-solides. Elles sont notamment très sensibles à la transformation par des virus oncogènes à ADN tels que le SV40 et le virus du sarcome murin, et ont été testées négatives pour le virus de l'ectromélie (mousepox), ce qui ajoute une valeur supplémentaire à la recherche virologique et oncologique.

Tissu
Embryon
Synonymes
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Classification

Organisme
Souris
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Fibroblaste
Tumorigène
Non, les cellules n'étaient pas tumorigènes chez les souris immunodéprimées, mais elles formaient des colonies en milieu semi-solide.

04Identifiants

Référence
BALB/3T3 clone A31 (Cytion numéro de catalogue 305155)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c
Âge du donneur
Embryon, 14 à 17 jours de gestation