Gå direkte til indholdet
BALB/3T3 clone A31
Væv
Embryo
Synonymer
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumenter

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Varenummer 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

BALB/3T3 klon A31, en fibroblastcellelinje udviklet af S.A. Aaronson og G.T. Todaro i 1968, stammer fra disaggregerede 14-17 dage gamle BALB/c-museembryoner. Denne cellelinje er et grundlæggende værktøj i studiet af cellebiologi, især kendt for sin evne til at understøtte virusvækst og modtagelighed for onkogene transformationer. Karakteristisk for disse celler er, at de er spindelformede fibroblaster, der kan fungere som multipotentielle mesenkymale celler. De har potentiale til at differentiere sig til forskellige væv afhængigt af mikromiljøpåvirkninger eller dyrkningsbetingelser, hvilket understreger deres alsidighed i eksperimentelle modeller.

Celledyrkningspraksis for BALB/3T3-klon A31 involverer gentagne overførsler, før de når konfluens, for at minimere celle-celle-kontakt, hvilket fremmer egenskaber som kontaktinhibering af celledeling, vækst ved høj fortynding og lav mætningstæthed. Disse celler udviser en varierende karyotype med et modalt antal på 78 kromosomer, der spænder fra 62 til 109, overvejende med telocentriske eller akrocentriske kromosomer. På trods af lejlighedsvise rapporter om cytogenetisk ustabilitet opretholder BALB/3T3 A31-celler en ikke-tumorigen status, selv om de viser tumorigeniske egenskaber, når de dyrkes i halvfaste medier. Især er de meget modtagelige for transformation af onkogene DNA-virus som SV40 og murin sarkomvirus, og de er testet negative for ectromelia-virus (musekopper), hvilket tilføjer endnu et lag af værdi til virologisk og onkologisk forskning.

Væv
Embryo
Synonymer
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast
Tumorfremkaldende
Nej, cellerne var ikke kræftfremkaldende i immunsupprimerede mus, men de dannede kolonier i et halvfast medium.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BALB/3T3-klon A31 (Cytion-katalognummer 305155)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
BALB/c
Donorens alder
Embryo, 14 til 17 dages drægtighed