Ga naar de inhoud
BALB/3T3 clone A31
Weefsel
Embryo
Synoniemen
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Documenten

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Productnummer 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

BALB/3T3 kloon A31, een fibroblastcellijn ontwikkeld door S.A. Aaronson en G.T. Todaro in 1968, is afkomstig van gedesaggregeerde 14- tot 17-dagen oude BALB/c muisembryo's. Deze cellijn is een fundamenteel hulpmiddel bij het bestuderen van celbiologie. Deze cellijn is een fundamenteel instrument in de studie van celbiologie, vooral bekend om zijn capaciteit om virusgroei te ondersteunen en gevoeligheid voor oncogene transformaties. Kenmerkend is dat deze cellen spoelvormige fibroblasten zijn die kunnen fungeren als multipotentiële mesenchymale cellen. Ze kunnen differentiëren in verschillende weefsels, afhankelijk van invloeden van de micro-omgeving of kweekomstandigheden, wat hun veelzijdigheid in experimentele modellen onderstreept.

De celkweekpraktijken voor BALB/3T3 kloon A31 omvatten herhaalde overplaatsingen voordat confluentie wordt bereikt om cel-cel contact te minimaliseren, wat eigenschappen bevordert zoals contactinhibitie van celdeling, groei bij hoge verdunning en lage verzadigingsdichtheid. Deze cellen vertonen een variabel karyotype met een modaal aantal van 78 chromosomen, variërend van 62 tot 109, met voornamelijk telocentrische of acrocentrische chromosomen. Ondanks incidentele meldingen van cytogenetische instabiliteit, behouden BALB/3T3 A31 cellen een niet-tumorigene status, hoewel ze tumorigene eigenschappen vertonen wanneer ze gekweekt worden in halfvaste media. Ze zijn met name zeer gevoelig voor transformatie door oncogene DNA-virussen zoals SV40 en murinesarcoomvirus en zijn negatief getest op het ectromeliavirus (muizenpokken), wat nog een extra laag van waarde toevoegt voor virologisch en oncologisch onderzoek.

Weefsel
Embryo
Synoniemen
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Classificatie

Organisme
Muis
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast
Tumorverwekkend
Nee, de cellen waren niet tumorigeen in immuunsuppressieve muizen, maar vormden wel kolonies in een halfvast medium.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
BALB/3T3 kloon A31 (Cytion catalogusnummer 305155)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
Embryo, 14 tot 17 dagen dracht