BALB/3T3 clone A31

BALB/3T3-klooni A31 on S.A. Aaronsonin ja G.T. Todaron vuonna 1968 kehittämä fibroblastisolulinja, joka on peräisin 14-17 päivän ikäisistä BALB/c-hiirten alkioista. Tämä solulinja on perustavanlaatuinen väline solubiologian tutkimuksessa, ja se on tunnettu erityisesti kyvystään tukea virusten kasvua ja alttiudestaan onkogeenisille muunnoksille. Näille soluille on ominaista, että ne ovat spindelinmuotoisia fibroblasteja, jotka voivat toimia monipotentiaalisina mesenkyymisoluina. Ne osoittavat, että ne voivat erilaistua erilaisiksi kudoksiksi riippuen mikroympäristön vaikutuksista tai viljelyolosuhteista, mikä korostaa niiden monipuolisuutta kokeellisissa malleissa.

BALB/3T3-kloonin A31 soluviljelykäytäntöihin kuuluu toistuvia siirtoja ennen konfluenssin saavuttamista solujen ja solujen välisen kosketuksen minimoimiseksi, mikä edistää sellaisia ominaisuuksia kuin solujen jakautumisen estyminen kosketuksen avulla, kasvu suurella laimennuksella ja matala kylläisyystiheys. Näiden solujen karyotyyppi vaihtelee, ja niiden kromosomien modaaliluku on 78, mutta vaihtelee 62:sta 109:ään, ja niissä on pääasiassa telosentrisiä tai akrosentrisiä kromosomeja. Huolimatta satunnaisista sytogeneettistä epävakautta koskevista tiedoista BALB/3T3 A31 -solut eivät ole tumorigeenisiä, vaikka niillä on tumorigeenisiä ominaisuuksia, kun niitä viljellään puolikiinteissä väliaineissa. Ne ovat erittäin alttiita onkogeenisten DNA-virusten, kuten SV40- ja hiiren sarkoomaviruksen, aiheuttamalle transformaatiolle, ja ne ovat osoittautuneet negatiivisiksi ektromelia-virukselle (hiiren rokolle), mikä lisää niiden arvoa virologisessa ja onkologisessa tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa