الانتقال إلى المحتوى
BALB/3T3 clone A31
الأنسجة
الجنين
المرادفات
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

المستندات

BALB/3T3 clone A31

Cell line · رقم المنتج 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

BALB/3T3 المستنسخ A31، وهو خط خلوي من الخلايا الليفية طوره س. أ. أرونسون وج. تودارو في عام 1968، وهو ينشأ من أجنة الفأر BALB/c التي يتراوح عمرها بين 14 و17 يوماً. ويُعد هذا الخط الخلوي أداة أساسية في دراسة البيولوجيا الخلوية، ويُعرف بشكل خاص بقدرته على دعم نمو الفيروسات وقابليته للتحول الورمي. تتميز هذه الخلايا بأنها أرومات ليفية مغزلية الشكل يمكن أن تعمل كخلايا متعددة الإمكانات. وتُظهر هذه الخلايا القدرة على التمايز إلى أنسجة مختلفة اعتمادًا على التأثيرات البيئية الدقيقة أو ظروف الاستزراع، مما يؤكد على تنوعها في النماذج التجريبية.

تتضمن ممارسات زراعة خلايا BALB/3T3 المستنسخة A31 عمليات نقل متكررة قبل الوصول إلى التقاء الخلايا لتقليل التلامس بين الخلايا إلى الحد الأدنى، مما يعزز خصائص مثل تثبيط انقسام الخلايا بالتلامس والنمو بتخفيف عالٍ وكثافة تشبع منخفضة. تُظهر هذه الخلايا تباينًا في النمط النووي مع عدد نموذجي من 78 كروموسومًا، يتراوح بين 62 و109 كروموسومات، وتتميز في الغالب بكروموسومات تيلوسنترية أو كروموسومات أكروسنترية. على الرغم من التقارير العرضية عن عدم الاستقرار الوراثي الخلوي، تحافظ خلايا BALB/3T3 A31 على حالة غير ورمية على الرغم من أنها تُظهر خصائص ورمية عند زراعتها في أوساط شبه صلبة. والجدير بالذكر أنها معرضة بشكل كبير للتحول بواسطة فيروسات الحمض النووي الورمية مثل فيروس SV40 وفيروس ساركوما الفئران، كما أنها سلبية لفيروس إكتروميليا (جدري الفأر)، مما يضيف قيمة أخرى للأبحاث الفيروسية والأورام.

الأنسجة
الجنين
المرادفات
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
لا، لم تكن الخلايا مولدة للأورام في الفئران المثبطة للمناعة، ولكنها شكلت مستعمرات في وسط شبه صلب.

04المعرّفات

المرجع
نسخة BALB/3T3 A31 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305155)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0184

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج
عمر المتبرع
الجنين، من 14 إلى 17 يوماً من الحمل