BALB/3T3 clone A31

BALB/3T3 kloon A31, S.A. Aaronsoni ja G.T. Todaro poolt 1968. aastal välja töötatud fibroblastide rakuliin, pärineb 14-17 päeva vanustest BALB/c hiirte embrüotest. See rakuliin on oluline vahend rakubioloogia uurimisel, mis on eelkõige tuntud oma võime poolest toetada viiruste kasvu ja vastuvõtlikkust onkogeensetele muundumistele. Need rakud on iseloomulikud spindlikujulised fibroblastid, mis võivad toimida multipotentsiaalsete mesenhüümiliste rakkudena. Nad näitavad potentsiaali diferentseeruda erinevateks kudedeks sõltuvalt mikrokeskkonna mõjudest või kasvatustingimustest, mis rõhutab nende mitmekülgsust eksperimentaalsetes mudelites.

BALB/3T3 klooni A31 rakukultuurimeetodid hõlmavad korduvaid ülekandeid enne konfluentsuse saavutamist, et minimeerida rakkude ja rakkude kontakti, soodustades selliseid omadusi nagu rakkude jagunemise kontaktinhibeerimine, kasv suure lahjendusastmega ja madal küllastustihedus. Nende rakkude karyotüüp on varieeruv ja nende kromosoomide keskmine arv on 78, mis ulatub 62-st kuni 109-ni, kusjuures kromosoomid on valdavalt telotsentrilised või akrotsentrilised. Hoolimata aeg-ajalt ilmnenud tsütogeneetilisest ebastabiilsusest on BALB/3T3 A31 rakud jätkuvalt mittetuumorigeensed, kuigi poolkindlates söötmetes kasvatamisel on neil tumorigeenseid omadusi. Eelkõige on nad väga tundlikud onkogeensete DNA-viiruste, nagu SV40 ja hiire sarkoomiviiruse transformatsioonile ning on osutunud negatiivseks ektromelia viiruse (hiirepõletik) suhtes, mis lisab neile veel ühe väärtuse viroloogiliste ja onkoloogiliste uuringute jaoks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest