BALB/3T3 clone A31

Il clone A31 di BALB/3T3, una linea cellulare di fibroblasti sviluppata da S.A. Aaronson e G.T. Todaro nel 1968, proviene da embrioni disaggregati di topo BALB/c di 14-17 giorni. Questa linea cellulare è uno strumento fondamentale per lo studio della biologia cellulare, in particolare per la sua capacità di sostenere la crescita virale e la suscettibilità alle trasformazioni oncogeniche. Queste cellule sono fibroblasti a forma di fuso che possono agire come cellule mesenchimali multipotenziali. Esse dimostrano il potenziale di differenziazione in vari tessuti a seconda delle influenze microambientali o delle condizioni di coltura, sottolineando la loro versatilità nei modelli sperimentali.

Le pratiche di coltura cellulare per il clone A31 di BALB/3T3 prevedono trasferimenti ripetuti prima di raggiungere la confluenza per ridurre al minimo il contatto cellula-cellula, promuovendo caratteristiche quali l'inibizione della divisione cellulare per contatto, la crescita ad alta diluizione e la bassa densità di saturazione. Queste cellule presentano una variabilità del cariotipo con un numero modale di 78 cromosomi, che varia da 62 a 109, con predominanza di cromosomi telocentrici o acrocentrici. Nonostante le segnalazioni occasionali di instabilità citogenetica, le cellule BALB/3T3 A31 mantengono uno stato non tumorigenico, anche se mostrano proprietà tumorigeniche quando vengono coltivate in terreni semisolidi. In particolare, sono altamente suscettibili alla trasformazione da parte di virus oncogeni a DNA come SV40 e il virus del sarcoma murino e sono risultate negative al virus dell'ectromelia (vaiolo del topo), aggiungendo un ulteriore valore per la ricerca virologica e oncologica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia