Pereiti prie turinio
BALB/3T3 clone A31
Audinys
Embrionas
Sinonimai
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumentai

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Prekės numeris 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

BALB/3T3 klonas A31 - S. A. Aaronsono ir G. T. Todaro 1968 m. sukurta fibroblastinių ląstelių linija, kilusi iš 14-17 dienų amžiaus BALB/c pelių embrionų. Ši ląstelių linija yra pagrindinė ląstelės biologijos tyrimų priemonė, ypač pasižyminti gebėjimu palaikyti virusų augimą ir jautrumu onkogeninėms transformacijoms. Šioms ląstelėms būdingi verpstės formos fibroblastai, kurie gali veikti kaip multipotencialios mezenchiminės ląstelės. Jos demonstruoja potencialą diferencijuotis į įvairius audinius, priklausomai nuo mikroaplinkos poveikio ar auginimo sąlygų, o tai pabrėžia jų universalumą eksperimentiniuose modeliuose.

BALB/3T3 klono A31 ląstelių auginimo praktika apima pakartotinį perkėlimą prieš pasiekiant konfliuencinį būvį, kad būtų sumažintas ląstelių kontaktas, skatinant tokias savybes, kaip ląstelių dalijimosi slopinimas, augimas esant dideliam praskiedimui ir mažam prisotinimo tankiui. Šios ląstelės pasižymi kariotipo kintamumu: vidutinis chromosomų skaičius yra 78 chromosomos, svyruoja nuo 62 iki 109, daugiausia telocentrinių arba akrocentrinių chromosomų. Nepaisant to, kad kartais pranešama apie citogenetinį nestabilumą, BALB/3T3 A31 ląstelės išlieka netumorigeninės, nors kultivuojamos pusiau kietose terpėse jos pasižymi tumorigeninėmis savybėmis. Pažymėtina, kad jos labai jautrios transformacijai, kurią sukelia onkogeniniai DNR virusai, pavyzdžiui, SV40 ir pelių sarkomos virusas, o ektromelijos viruso (pelių raupų) tyrimai buvo neigiami, todėl jos turi dar vieną vertę virusologiniams ir onkologiniams tyrimams.

Audinys
Embrionas
Sinonimai
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Fibroblastai
Tumorogeninis
Ne, ląstelės nebuvo navikinės imunosupresinėms pelėms, tačiau pusiau kietoje terpėje sudarė kolonijas.

04Identifikatoriai

Nuoroda
BALB/3T3 klonas A31 (Cytion katalogo numeris 305155)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
BALB/c
Donoro amžius
Embrionas, 14-17 nėštumo dienų