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BALB/3T3 clone A31
Gewebe
Embryo
Synonyme
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

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BALB/3T3 clone A31

Cell line · Artikelnummer 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Der BALB/3T3-Klon A31, eine Fibroblasten-Zelllinie, die 1968 von S.A. Aaronson und G.T. Todaro entwickelt wurde, stammt von disaggregierten 14 bis 17 Tage alten BALB/c-Mausembryonen. Diese Zelllinie ist ein grundlegendes Instrument zur Erforschung der Zellbiologie und zeichnet sich vor allem durch ihre Fähigkeit aus, das Wachstum von Viren zu unterstützen, sowie durch ihre Anfälligkeit für onkogene Transformationen. Charakteristisch für diese Zellen sind spindelförmige Fibroblasten, die als multipotente mesenchymale Zellen fungieren können. Sie weisen das Potenzial auf, sich je nach Mikroumgebungseinflüssen oder Kulturbedingungen in verschiedene Gewebe zu differenzieren, was ihre Vielseitigkeit in experimentellen Modellen unterstreicht.

Die Zellkulturpraktiken für den BALB/3T3-Klon A31 beinhalten wiederholte Transfers vor Erreichen der Konfluenz, um den Zell-Zell-Kontakt zu minimieren und Eigenschaften wie Kontakthemmung der Zellteilung, Wachstum bei hoher Verdünnung und niedriger Sättigungsdichte zu fördern. Diese Zellen weisen einen variablen Karyotyp mit einer durchschnittlichen Anzahl von 78 Chromosomen auf, der von 62 bis 109 reicht und überwiegend telozentrische oder akrozentrische Chromosomen aufweist. Trotz gelegentlicher Berichte über zytogenetische Instabilität sind BALB/3T3 A31-Zellen nicht tumorigen, obwohl sie tumorigene Eigenschaften aufweisen, wenn sie in halbfesten Medien kultiviert werden. Insbesondere sind sie sehr anfällig für die Transformation durch onkogene DNA-Viren wie SV40 und das murine Sarkom-Virus und wurden negativ auf das Ektromelie-Virus (Mauspocken) getestet, was für die virologische und onkologische Forschung von zusätzlichem Wert ist.

Gewebe
Embryo
Synonyme
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten
Tumorauslösend
Nein, die Zellen waren in immunsupprimierten Mäusen nicht tumorerzeugend, bildeten aber in halbfestem Medium Kolonien.

04Bezeichner

Quellenangabe
BALB/3T3 clone A31 (Cytion Katalognummer 305155)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
BALB/c
Alter des Spenders
Embryo, 14 bis 17 Tage Trächtigkeit