Preskoči na vsebino
BALB/3T3 clone A31
Tkivo
Zarodek
Sinonimi
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumenti

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Številka izdelka 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

BALB/3T3 klon A31, linija fibroblastnih celic, ki sta jo leta 1968 razvila S.A. Aaronson in G.T. Todaro, izvira iz razkosanih 14- do 17 dni starih zarodkov miši BALB/c. Ta celična linija je temeljno orodje za preučevanje celične biologije, zlasti zaradi sposobnosti podpiranja rasti virusov in dovzetnosti za onkogene transformacije. Za te celice je značilno, da so vretenasto oblikovani fibroblasti, ki lahko delujejo kot multipotencialne mezenhimske celice. Izkazujejo možnost diferenciacije v različna tkiva, odvisno od vplivov mikrookolja ali pogojev gojenja, kar poudarja njihovo vsestranskost v eksperimentalnih modelih.

Postopki gojenja celic za klon BALB/3T3 A31 vključujejo ponavljajoče se prenose, preden dosežejo konfluenco, da se čim bolj zmanjša stik celic s celicami, kar spodbuja lastnosti, kot so zaviranje delitve celic ob stiku, rast pri visokem razredčenju in nizka gostota nasičenja. Te celice imajo spremenljiv kariotip z modalnim številom 78 kromosomov, od 62 do 109, s pretežno telocentričnimi ali akrocentričnimi kromosomi. Kljub občasnim poročilom o citogenetski nestabilnosti so celice BALB/3T3 A31 netumorogene, čeprav kažejo tumorogene lastnosti pri gojenju v poltrdnem gojišču. Zlasti so zelo dovzetne za transformacijo z onkogenimi DNK virusi, kot sta SV40 in virus mišjega sarkoma, in so negativne za virus ektromelije (mišje ošpice), kar dodaja še eno raven vrednosti za virološke in onkološke raziskave.

Tkivo
Zarodek
Sinonimi
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast
Tumorigeničen
Ne, celice pri imunosuprimiranih miših niso bile tumorogene, vendar so tvorile kolonije v poltrdnem gojišču.

04Identifikatorji

Navajanje vira
Klon BALB/3T3 A31 (kataloška številka Cytion 305155)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
Zarodek, 14 do 17 dni nosečnosti