Премини към съдържанието
BALB/3T3 clone A31
Тъкан
Ембрион
Синоними
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Документи

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Номер на продукта 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

BALB/3T3 клонинг A31, фибробластна клетъчна линия, разработена от S.A. Aaronson и G.T. Todaro през 1968 г., произхожда от дезагрегирани 14- до 17-дневни миши ембриони BALB/c. Тази клетъчна линия е фундаментален инструмент в изследването на клетъчната биология, като особено се отличава със способността си да поддържа вирусния растеж и податливостта си на онкогенни трансформации. Характерно за тези клетки е, че са вретеновидни фибробласти, които могат да действат като мултипотенциални мезенхимни клетки. Те демонстрират потенциал да се диференцират в различни тъкани в зависимост от влиянието на микросредата или условията на култивиране, което подчертава тяхната универсалност в експерименталните модели.

Практиките за клетъчно култивиране на BALB/3T3 клонинг A31 включват многократни премествания преди достигане на конфлуенция, за да се сведе до минимум контактът между клетките, като се насърчават характеристики като контактно инхибиране на клетъчното делене, растеж при високо разреждане и ниска плътност на насищане. Тези клетки показват вариабилност на кариотипа с модален брой от 78 хромозоми, вариращ от 62 до 109, предимно с телоцентрични или акроцентрични хромозоми. Въпреки че понякога се съобщава за цитогенетична нестабилност, клетките BALB/3T3 A31 поддържат нетуморен статус, въпреки че проявяват туморогенни свойства, когато се култивират в полутвърди среди. Забележително е, че те са силно податливи на трансформация от онкогенни ДНК вируси като SV40 и миши саркома вирус и са отрицателни за вируса на ектромелия (миша едра шарка), което добавя още едно ниво на стойност за вирусологични и онкологични изследвания.

Тъкан
Ембрион
Синоними
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Фибробласти
Туморогенен
Не, клетките не са били туморогенни при имуносупресирани мишки, но са образували колонии в полутвърда среда.

04Идентификатори

Източник
BALB/3T3 клон A31 (каталожен номер на Cytion 305155)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_0184

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
BALB/c
Възраст на донора
Ембрион, 14 до 17 дни бременност