Tartalomra ugrás
BALB/3T3 clone A31
Szövet
Embrió
Szinonimák
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumentumok

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Termékszám 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BALB/3T3 A31 klón, egy S.A. Aaronson és G.T. Todaro által 1968-ban kifejlesztett fibroblaszt sejtvonal, amely 14-17 napos BALB/c egér embriókból származik. Ez a sejtvonal a sejtbiológia tanulmányozásának alapvető eszköze, különösen a vírusnövekedést támogató képességéről és az onkogén átalakulásokra való fogékonyságáról ismert. Jellemzően ezek a sejtek orsó alakú fibroblasztok, amelyek multipotens mesenchymasejtként is működhetnek. A mikrokörnyezeti hatásoktól vagy a tenyésztési körülményektől függően különböző szövetekké differenciálódhatnak, ami kiemeli sokoldalúságukat a kísérleti modellekben.

A BALB/3T3 A31 klónra vonatkozó sejttenyésztési gyakorlatok a sejt-sejt érintkezés minimalizálása érdekében a konfluencia elérése előtt ismételt átültetéseket tartalmaznak, ami elősegíti az olyan jellemzőket, mint a sejtosztódás kontaktusgátlása, a nagy hígítású növekedés és az alacsony telítési sűrűség. Ezek a sejtek kariotípusa változatos, 78 kromoszóma modális számával, amely 62 és 109 között mozog, és túlnyomórészt telocentrikus vagy akrocentrikus kromoszómákat tartalmaz. A citogenetikai instabilitásról szóló alkalmi jelentések ellenére a BALB/3T3 A31 sejtek nem tumorigén státuszúak, bár félszilárd táptalajon tenyésztve tumorigén tulajdonságokat mutatnak. Figyelemre méltó, hogy rendkívül érzékenyek az olyan onkogén DNS-vírusok, mint az SV40 és az egérszarkóma vírus általi transzformációra, és negatívak az ektromélia vírusra (egérhimlő), ami újabb értéket jelent a virológiai és onkológiai kutatások számára.

Szövet
Embrió
Szinonimák
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblasztok
Daganatképző
Nem, a sejtek immunszupprimált egerekben nem voltak tumorogének, de félszilárd táptalajon kolóniákat képeztek.

04Azonosítók

Hivatkozás
BALB/3T3 A31 klón (Cytion katalógusszám: 305155)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
Embrió, 14-17 napos vemhességben