BALB/3T3 clone A31

BALB/3T3 klons A31, S.A. Aaronsona un G.T. Todaro 1968. gadā izveidotā fibroblastu šūnu līnija, ir radusies no 14 līdz 17 dienas veciem BALB/c peļu embrijiem. Šī šūnu līnija ir fundamentāls instruments šūnu bioloģijas pētniecībā, jo īpaši pateicoties tās spējai atbalstīt vīrusu augšanu un uzņēmībai pret onkogēnām transformācijām. Šīm šūnām ir raksturīgi vārpstas formas fibroblasti, kas var darboties kā multipotenciālas mezenhimālas šūnas. Tām piemīt potenciāls diferencēties dažādos audos atkarībā no mikrovides ietekmes vai kultūras apstākļiem, uzsverot to daudzpusību eksperimentālos modeļos.

BALB/3T3 A31 klona šūnu kultivēšanas prakse ietver atkārtotu pārvietošanu pirms konfluences sasniegšanas, lai līdz minimumam samazinātu šūnu un šūnu kontaktu, veicinot tādas īpašības kā šūnu dalīšanās kontakta inhibīciju, augšanu pie liela atšķaidījuma un zemu piesātinājuma blīvumu. Šīm šūnām ir mainīgs kariotips, kura modālais hromosomu skaits ir 78 hromosomas, no 62 līdz 109, pārsvarā ar telocentriskām vai akrocentriskām hromosomām. Neraugoties uz atsevišķiem ziņojumiem par citogenētisko nestabilitāti, BALB/3T3 A31 šūnas saglabā tumorogēnu statusu, lai gan, kultivējot puscietās barotnēs, tām piemīt tumorogēnas īpašības. Īpaši jāatzīmē, ka tās ir ļoti uzņēmīgas pret transformāciju ar onkogēniem DNS vīrusiem, piemēram, SV40 un peļu sarkomas vīrusu, un to testi uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakas) ir negatīvi, kas pievieno vēl vienu vērtību virusoloģiskiem un onkoloģiskiem pētījumiem.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu