Přejít na obsah
BALB/3T3 clone A31
Tkáň
Embrya
Synonyma
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumenty

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Číslo výrobku 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

BALB/3T3 klon A31, fibroblastová buněčná linie vyvinutá S. A. Aaronsonem a G. T. Todarem v roce 1968, pochází z rozdělených 14 až 17denních myších embryí BALB/c. Tato buněčná linie je základním nástrojem při studiu buněčné biologie, zejména je známá svou schopností podporovat růst virů a náchylností k onkogenním transformacím. Charakteristické je, že tyto buňky jsou vřetenovité fibroblasty, které mohou fungovat jako multipotenciální mezenchymální buňky. Vykazují potenciál diferencovat se do různých tkání v závislosti na vlivech mikroprostředí nebo kultivačních podmínkách, což podtrhuje jejich všestrannost v experimentálních modelech.

Postupy kultivace buněk klonu BALB/3T3 A31 zahrnují opakované přesuny před dosažením konfluence, aby se minimalizoval kontakt buněk s buňkami, což podporuje vlastnosti, jako je inhibice dělení buněk kontaktem, růst při vysokém ředění a nízká hustota nasycení. Tyto buňky vykazují variabilitu karyotypu s modálním počtem 78 chromozomů v rozmezí od 62 do 109, převážně s telocentrickými nebo akrocentrickými chromozomy. Navzdory občasným zprávám o cytogenetické nestabilitě si buňky BALB/3T3 A31 zachovávají nenádorový status, ačkoli při kultivaci v polotuhém médiu vykazují nádorové vlastnosti. Pozoruhodné je, že jsou vysoce citlivé na transformaci onkogenními DNA viry, jako je SV40 a virus myšího sarkomu, a byly negativní na virus ektromelie (myší neštovice), což jim dodává další vrstvu hodnoty pro virologický a onkologický výzkum.

Tkáň
Embrya
Synonyma
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty
Tumorogenní
Ne, buňky nebyly u imunosuprimovaných myší nádorové, ale tvořily kolonie v polotuhém médiu.

04Identifikátory

Citace
BALB/3T3 klon A31 (katalogové číslo Cytion 305155)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c
Věk dárce
Embryo, 14 až 17 dní těhotenství