Przejdź do treści
BALB/3T3 clone A31
Chusteczka
Zarodek
Synonimy
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumenty

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Numer produktu 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Klon BALB/3T3 A31, linia komórkowa fibroblastów opracowana przez S.A. Aaronsona i G.T. Todaro w 1968 roku, pochodzi z 14-17-dniowych zarodków myszy BALB/c. Ta linia komórkowa jest podstawowym narzędziem w badaniu biologii komórkowej, szczególnie ze względu na jej zdolność do wspomagania wzrostu wirusów i podatność na transformacje onkogenne. Charakterystyczną cechą tych komórek są fibroblasty o wrzecionowatym kształcie, które mogą działać jako multipotencjalne komórki mezenchymalne. Wykazują one potencjał do różnicowania się w różne tkanki w zależności od wpływu mikrośrodowiska lub warunków hodowli, co podkreśla ich wszechstronność w modelach eksperymentalnych.

Hodowla komórkowa klonu BALB/3T3 A31 obejmuje wielokrotne transfery przed osiągnięciem konfluencji w celu zminimalizowania kontaktu komórka-komórka, promując takie cechy, jak hamowanie kontaktu podziału komórek, wzrost w dużym rozcieńczeniu i niską gęstość nasycenia. Komórki te wykazują zmienność kariotypu z modalną liczbą 78 chromosomów, w zakresie od 62 do 109, głównie z chromosomami telocentrycznymi lub akrocentrycznymi. Pomimo sporadycznych doniesień o niestabilności cytogenetycznej, komórki BALB/3T3 A31 zachowują status nienowotworowych, choć wykazują właściwości nowotworowe, gdy są hodowane w pożywkach półstałych. Warto zauważyć, że są one wysoce podatne na transformację przez onkogenne wirusy DNA, takie jak SV40 i wirus mięsaka mysiego, a testy na obecność wirusa ektromelii (mousepox) dały wynik ujemny, dodając kolejną warstwę wartości dla badań wirusologicznych i onkologicznych.

Chusteczka
Zarodek
Synonimy
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Fibroblast
Nowotworotwórczy
Nie, komórki nie były nowotworowe u myszy poddanych immunosupresji, ale tworzyły kolonie w pożywce półstałej.

04Identyfikatory

Źródło
Klon BALB/3T3 A31 (numer katalogowy Cytion 305155)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c
Wiek dawcy
Zarodek, od 14 do 17 dnia ciąży