BALB/3T3 clone A31

O clone A31 de BALB/3T3, uma linha celular de fibroblastos desenvolvida por S.A. Aaronson e G.T. Todaro em 1968, tem origem em embriões desagregados de ratinho BALB/c com 14 a 17 dias de idade. Esta linha celular é uma ferramenta fundamental no estudo da biologia celular, particularmente notável pela sua capacidade de suportar o crescimento de vírus e a suscetibilidade a transformações oncogénicas. Caracteristicamente, estas células são fibroblastos fusiformes que podem atuar como células mesenquimatosas multipotenciais. Demonstram o potencial para se diferenciarem em vários tecidos, dependendo das influências microambientais ou das condições de cultura, o que sublinha a sua versatilidade em modelos experimentais.

As práticas de cultura celular para o clone BALB/3T3 A31 envolvem transferências repetidas antes de atingir a confluência para minimizar o contacto célula-célula, promovendo caraterísticas como a inibição da divisão celular por contacto, o crescimento a alta diluição e a baixa densidade de saturação. Estas células apresentam uma variabilidade de cariótipo com um número modal de 78 cromossomas, variando entre 62 e 109, predominantemente com cromossomas telocêntricos ou acrocêntricos. Apesar de relatos ocasionais de instabilidade citogenética, as células BALB/3T3 A31 mantêm um estatuto não tumorigénico, embora apresentem propriedades tumorigénicas quando cultivadas em meios semi-sólidos. Nomeadamente, são altamente susceptíveis à transformação por vírus de ADN oncogénicos, como o SV40 e o vírus do sarcoma murino, e apresentaram resultados negativos para o vírus da ectromelia (varíola do rato), o que acrescenta outro nível de valor para a investigação virológica e oncológica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia