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BALB/3T3 clone A31
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BALB/3T3 clone A31

Cell line · 제품 번호 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

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01일반 정보

설명

1968년 S.A. 아론슨과 G.T. 토다로가 개발한 섬유아세포 세포주인 BALB/3T3 클론 A31은 14일~17일 된 BALB/c 마우스 배아에서 유래했습니다. 이 세포주는 세포 생물학 연구의 기본 도구로, 특히 바이러스 성장과 발암성 변형에 대한 감수성을 지원하는 능력으로 유명합니다. 특징적으로 이 세포는 스핀들 모양의 섬유아세포로, 다능성 중간엽 세포로 작용할 수 있습니다. 미세 환경의 영향이나 배양 조건에 따라 다양한 조직으로 분화할 수 있는 잠재력을 보여줌으로써 실험 모델에서 다용도성을 강조합니다.

BALB/3T3 클론 A31의 세포 배양 방식은 세포와 세포의 접촉을 최소화하기 위해 합류점에 도달하기 전에 반복적인 이동을 통해 세포 분열의 접촉 억제, 높은 희석에서의 성장, 낮은 포화 밀도와 같은 특성을 촉진합니다. 이 세포는 62~109개에 이르는 78개의 염색체 모달 수를 가진 핵형 다양성을 나타내며, 주로 원심성 또는 상심성 염색체를 특징으로 합니다. 간혹 세포유전학적 불안정성에 대한 보고가 있지만, BALB/3T3 A31 세포는 반고체 배지에서 배양할 때 종양 유발 특성을 보이지만 비종양성 상태를 유지합니다. 특히, SV40 및 쥐 육종 바이러스와 같은 발암성 DNA 바이러스에 의한 형질 전환에 매우 취약하며, 외배엽 바이러스(쥐두종)에 대해 음성 반응을 보여 바이러스학 및 종양학 연구에 또 다른 가치를 더하고 있습니다.

티슈
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02분류

생물체
마우스
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
섬유아세포
종양 유발성
아니요, 이 세포는 면역 억제 마우스에서 종양 유발성이 없었지만 반고체 배지에서 콜로니를 형성했습니다.

04식별자

인용
BALB/3T3 클론 A31 (Cytion 카탈로그 번호 305155)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_0184

05취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

07기부자

품종 / 아종
BALB/c
기증자 연령
배아, 임신 14~17일