Перейти до вмісту
BALB/3T3 clone A31
Тканина
Ембріон
Синоніми
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Документи

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Номер товару 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія фібробластів BALB/3T3 клон A31, розроблена S.A. Aaronson і G.T. Todaro в 1968 році, походить від дезагрегованих 14-17-денних ембріонів мишей BALB/c. Ця клітинна лінія є фундаментальним інструментом у вивченні клітинної біології, особливо відома своєю здатністю підтримувати ріст вірусів і сприйнятливістю до онкогенних трансформацій. Характерно, що ці клітини є веретеноподібними фібробластами, які можуть діяти як мультипотенційні мезенхімальні клітини. Вони демонструють здатність диференціюватися в різні тканини залежно від впливу мікросередовища або умов культивування, що підкреслює їх універсальність в експериментальних моделях.

Методика культивування клітин BALB/3T3 клону A31 передбачає багаторазове перенесення до досягнення злиття для мінімізації контакту між клітинами, що сприяє таким характеристикам, як контактне інгібування поділу клітин, ріст при високому розведенні та низька щільність насичення. Ці клітини демонструють варіабельність каріотипу з модальним числом 78 хромосом, що варіює від 62 до 109, переважно з телецентричними або акроцентричними хромосомами. Незважаючи на окремі повідомлення про цитогенетичну нестабільність, клітини BALB/3T3 A31 зберігають непухлинний статус, хоча і виявляють пухлинні властивості при культивуванні в напівтвердих середовищах. Зокрема, вони дуже чутливі до трансформації онкогенними ДНК-вірусами, такими як SV40 і вірус саркоми мишей, а також негативно реагують на вірус ектромелії (мишачої віспи), що додає ще один рівень цінності для вірусологічних та онкологічних досліджень.

Тканина
Ембріон
Синоніми
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Класифікація

Організм
Миша
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробласт
Пухлиноутворювальний
Ні, клітини не були пухлиноподібними у мишей з пригніченим імунітетом, але утворювали колонії в напівтвердому середовищі.

04Ідентифікатори

Посилання
Клон BALB/3T3 A31 (номер у каталозі Cytion — 305155)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_0184

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Порода / підвид
BALB/c
Вік донора
Ембріон, 14-17 днів вагітності