Prejsť na obsah
BALB/3T3 clone A31
Tkanivo
Embryo
Synonymá
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Dokumenty

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Číslo výrobku 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

BALB/3T3 klon A31, fibroblastová bunková línia vyvinutá S.A. Aaronsonom a G.T. Todarom v roku 1968, pochádza z dezagregovaných 14- až 17-dňových myších embryí BALB/c. Táto bunková línia je základným nástrojom pri štúdiu bunkovej biológie, najmä vďaka svojej schopnosti podporovať rast vírusov a náchylnosti na onkogénne transformácie. Pre tieto bunky je charakteristické, že ide o vretenovité fibroblasty, ktoré môžu pôsobiť ako multipotenciálne mezenchýmové bunky. Vykazujú potenciál diferencovať sa na rôzne tkanivá v závislosti od vplyvov mikroprostredia alebo podmienok kultivácie, čo zdôrazňuje ich všestrannosť v experimentálnych modeloch.

Postupy kultivácie buniek klonu BALB/3T3 A31 zahŕňajú opakované presuny pred dosiahnutím konfluencie, aby sa minimalizoval kontakt buniek s bunkami, čo podporuje vlastnosti, ako je inhibícia delenia buniek kontaktom, rast pri vysokom riedení a nízka hustota nasýtenia. Tieto bunky vykazujú variabilitu karyotypu s modálnym počtom 78 chromozómov, v rozmedzí od 62 do 109, s prevažne telocentrickými alebo akrocentrickými chromozómami. Napriek občasným správam o cytogenetickej nestabilite si bunky BALB/3T3 A31 zachovávajú nenádorový status, hoci pri kultivácii v polotuhom médiu vykazujú nádorové vlastnosti. Pozoruhodné je, že sú veľmi citlivé na transformáciu onkogénnymi DNA vírusmi, ako sú SV40 a vírus myšieho sarkómu, a boli negatívne testované na vírus ektromélie (myšie kiahne), čo pridáva ďalšiu vrstvu hodnoty pre virologický a onkologický výskum.

Tkanivo
Embryo
Synonymá
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty
Tumorigenický
Nie, bunky neboli u imunosuprimovaných myší nádorové, ale vytvárali kolónie v polotuhom médiu.

04Identifikátory

Citácia
Klon A31 z línie BALB/3T3 (katalógové číslo Cytion 305155)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
BALB/c
Vek darcu
Embryo, 14 až 17 dní tehotenstva