CERV-196

La lignée cellulaire MRI-H196, dérivée d'un carcinome cervical HPV16 positif, présente un profil d'expression unique des transcrits HPV16, caractérisé par la présence du transcrit L1 complet et une absence marquée de l'ARN E5 complet. Ce profil suggère une intégration du génome HPV16 dans la lignée cellulaire, affectant particulièrement la région E2 et provoquant un réarrangement de la séquence d'ADN L1. L'absence d'expression de l'ARN de pleine longueur E5 indique une perturbation de la transcription des ARN précoces de pleine longueur, qui se termine généralement au niveau du signal de polyadénylation situé en aval du cadre de lecture ouvert (ORF) de l'E5. Cette perturbation est révélatrice de l'état d'intégration des génomes HPV16, où la région cruciale E2 - clé de la réplication virale et de la régulation de la transcription - est souvent compromise au cours de l'intégration dans le génome de l'hôte. Cette perturbation peut avoir un impact sur l'expression des gènes en aval, y compris le gène E5.

Ce phénomène d'intégration dans les cellules MRI-H196 met en évidence la complexité du comportement du génome du HPV16 après l'intégration, soulignant l'utilité de la lignée cellulaire pour l'étude des subtilités génomiques et transcriptionnelles associées à l'intégration du HPV dans les carcinomes du col de l'utérus. La compréhension de cette dynamique est essentielle pour comprendre les mécanismes de l'oncogenèse et la progression des cancers associés au HPV, ce qui fait de la lignée cellulaire MRI-H196 une ressource précieuse pour la recherche médicale et biologique.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie