Langsung ke isi
CERV-196
Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma sel skuamosa
Sinonim
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

CERV-196

Cell line · Nomor produk 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel MRI-H196, yang berasal dari karsinoma serviks positif HPV16, menunjukkan profil ekspresi transkrip HPV16 yang unik yang ditandai dengan adanya transkrip L1 panjang penuh dan tidak adanya RNA panjang penuh E5. Pola ini menunjukkan adanya integrasi genom HPV16 di dalam garis sel, terutama yang memengaruhi wilayah E2 dan menyebabkan penataan ulang urutan DNA L1. Tidak adanya ekspresi RNA full-length E5 menunjukkan adanya gangguan pada transkripsi RNA awal full-length, yang biasanya berakhir pada sinyal poliadenilasi yang terletak di bagian hilir open reading frame (ORF) E5. Gangguan seperti itu menunjukkan keadaan terintegrasi genom HPV16, di mana wilayah E2 yang penting - kunci untuk replikasi virus dan regulasi transkripsi - sering dikompromikan selama integrasi ke dalam genom inang. Gangguan ini berpotensi berdampak pada ekspresi gen hilir, termasuk E5.

Fenomena integrasi dalam sel MRI-H196 ini menyoroti kompleksitas perilaku genom HPV16 pasca-integrasi, yang menekankan kegunaan garis sel dalam mempelajari seluk-beluk genom dan transkripsi yang terkait dengan integrasi HPV pada karsinoma serviks. Memahami dinamika ini sangat penting untuk memahami mekanisme onkogenesis dan perkembangan kanker terkait HPV, menjadikan garis sel MRI-H196 sebagai sumber daya yang berharga untuk penelitian medis dan biologi.

Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma sel skuamosa
Sinonim
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang

04Pengidentifikasi

Referensi
CERV-196 (Nomor katalog Cytion 300291)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Ekspresi dan kerentanan

Virus
HPV-16 positif
Produk
Cytokeratine 8, 18, Vimentin

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm² direkomendasikan
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
49 tahun
Etnis
Afrika