CERV-196

La línea celular MRI-H196, derivada de un carcinoma cervical VPH16 positivo, muestra un perfil de expresión del transcrito del VPH16 único, caracterizado por la presencia del transcrito L1 de longitud completa y una marcada ausencia del ARN E5 de longitud completa. Este patrón sugiere una integración del genoma HPV16 dentro de la línea celular, afectando particularmente a la región E2 y causando un reordenamiento de la secuencia de ADN L1. La ausencia de expresión del ARN de longitud completa E5 indica una interrupción en la transcripción de los ARN tempranos de longitud completa, que normalmente concluyen en la señal de poliadenilación situada aguas abajo del marco de lectura abierto (ORF) E5. Esta alteración es indicativa del estado de integración de los genomas del VPH16, en los que la región crucial E2 -clave para la replicación viral y la regulación de la transcripción- a menudo se ve comprometida durante la integración en el genoma del huésped. Esta alteración puede afectar a la expresión de genes posteriores, incluido el E5.

Este fenómeno de integración en las células MRI-H196 pone de manifiesto la complejidad del comportamiento del genoma del VPH16 tras la integración, y subraya la utilidad de la línea celular para estudiar las complejidades genómicas y transcripcionales asociadas a la integración del VPH en los carcinomas cervicales. Comprender esta dinámica es crucial para entender los mecanismos de la oncogénesis y la progresión de los cánceres asociados al VPH, lo que convierte a la línea celular MRI-H196 en un valioso recurso para la investigación médica y biológica.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía