.jpg)
- Tissue
- Cổ tử cung
- Disease
- Ung thư biểu mô vảy
- Synonyms
- Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196
Documents
CERV-196
Cell line · Product number 300291
The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...
Customization / Recommendations
- CERV-196Cell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
Dòng tế bào MRI-H196, được phân lập từ ung thư cổ tử cung dương tính với HPV16, có một mô hình biểu hiện transcript HPV16 đặc trưng bởi sự hiện diện của transcript L1 toàn dài và sự vắng mặt đáng kể của RNA E5 toàn dài. Mô hình này cho thấy sự tích hợp của bộ gen HPV16 vào dòng tế bào, đặc biệt ảnh hưởng đến vùng E2 và gây ra sự sắp xếp lại trình tự DNA L1. Sự vắng mặt của biểu hiện RNA toàn bộ E5 cho thấy sự gián đoạn trong quá trình phiên mã của các RNA sớm toàn bộ, vốn thường kết thúc tại tín hiệu polyadenylation nằm phía sau khung đọc mở (ORF) của E5. Sự gián đoạn này cho thấy trạng thái tích hợp của bộ gen HPV16, trong đó vùng E2 quan trọng - yếu tố then chốt cho quá trình sao chép virus và điều hòa phiên mã - thường bị tổn thương trong quá trình tích hợp vào bộ gen chủ. Sự gián đoạn này có thể ảnh hưởng đến biểu hiện của các gen ở hạ lưu, bao gồm E5.
Hiện tượng tích hợp này trong tế bào MRI-H196 nhấn mạnh sự phức tạp của hành vi bộ gen HPV16 sau khi tích hợp, nhấn mạnh tính hữu ích của dòng tế bào này trong việc nghiên cứu các phức tạp về bộ gen và phiên mã liên quan đến tích hợp HPV trong ung thư cổ tử cung. Hiểu rõ các động lực này là điều quan trọng để hiểu cơ chế gây ung thư và sự tiến triển của các bệnh ung thư liên quan đến HPV, khiến dòng tế bào MRI-H196 trở thành một nguồn tài nguyên quý giá cho nghiên cứu y học và sinh học.
- Tissue
- Cổ tử cung
- Disease
- Ung thư biểu mô vảy
- Synonyms
- Cerv-196
- MRI-H-196
- MRI-H196
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Tương tự biểu mô
- Tumourigenic
- Đúng vậy, ở chuột nude
04Identifiers
- Citation
- CERV-196 (Số catalog Cytion 300291)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5721
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Dương tính với HPV-16
- Products
- Cytokeratin 8, 18, Vimentin
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Seeding density
- 1 x 10⁴ tế bào/cm² được khuyến nghị.
- Fluid renewal
- 2 đến 3 lần mỗi tuần
- Post-thaw recovery
- Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
08Donor
- Donor age
- 49 năm
- Ethnicity
- Châu Phi
09Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes