CERV-196

MRI-H196-cellelinjen, som stammer fra HPV16-positivt livmorhalskreft, viser en unik HPV16-transkriptuttrykksprofil som kjennetegnes av tilstedeværelsen av L1-transkriptet i full lengde og et markant fravær av E5-RNA i full lengde. Dette mønsteret tyder på en integrering av HPV16-genomet i cellelinjen, noe som særlig påvirker E2-regionen og forårsaker omorganisering av L1-DNA-sekvensen. Fraværet av ekspresjon av E5 full-lengde RNA indikerer en forstyrrelse i transkripsjonen av tidlige full-lengde RNA, som vanligvis avsluttes ved polyadenyleringssignalet som ligger nedstrøms for E5 open reading frame (ORF). En slik forstyrrelse er en indikasjon på den integrerte tilstanden til HPV16-genomer, der den viktige E2-regionen - som er nøkkelen til virusreplikasjon og transkripsjonsregulering - ofte er kompromittert under integrasjonen i vertsgenomet. Denne forstyrrelsen kan potensielt påvirke uttrykket av nedstrømsgener, inkludert E5.

Dette integrasjonsfenomenet i MRI-H196-celler belyser kompleksiteten i HPV16-genomets oppførsel etter integrasjon, og understreker cellelinjens nytteverdi når det gjelder å studere de genomiske og transkripsjonsmessige komplikasjonene som er forbundet med HPV-integrasjon i livmorhalskarsinomer. Å forstå denne dynamikken er avgjørende for å få innsikt i mekanismene for onkogenese og utviklingen av HPV-assosiert kreft, noe som gjør MRI-H196-cellelinjen til en verdifull ressurs for medisinsk og biologisk forskning.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring