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Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

CERV-196

Cell line · 제품 번호 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

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01일반 정보

설명

HPV16 양성 자궁경부암에서 유래한 MRI-H196 세포주는 전장 L1 전사체의 존재와 E5 전장 RNA의 현저한 부재를 특징으로 하는 독특한 HPV16 전사체 발현 프로파일을 나타냅니다. 이 패턴은 세포주 내에서 HPV16 게놈이 통합되어 특히 E2 영역에 영향을 미치고 L1 DNA 서열의 재배열을 일으킨다는 것을 시사합니다. E5 전장 RNA 발현이 없다는 것은 전장 초기 RNA의 전사가 중단되었음을 나타내며, 이는 일반적으로 E5 오픈 리딩 프레임(ORF)의 하류에 위치한 폴리아데닐화 신호에서 마무리됩니다. 이러한 중단은 바이러스 복제 및 전사 조절의 핵심인 E2 영역이 숙주 게놈에 통합되는 과정에서 종종 손상되는 HPV16 게놈의 통합 상태를 나타냅니다. 이러한 중단은 잠재적으로 E5를 포함한 다운스트림 유전자의 발현에 영향을 미칩니다.

MRI-H196 세포 내에서 이러한 통합 현상은 통합 후 HPV16 게놈 동작의 복잡성을 강조하며, 자궁경부암에서 HPV 통합과 관련된 게놈 및 전사적 복잡성을 연구하는 데 있어 이 세포주의 유용성을 강조합니다. 이러한 역학을 이해하는 것은 종양 발생 메커니즘과 HPV 관련 암의 진행에 대한 통찰력을 얻는 데 매우 중요하므로 MRI-H196 세포주는 의학 및 생물학 연구에 귀중한 자원이 됩니다.

티슈
자궁경부
질병
편평상피 세포 암종
동의어
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
2

03특징

형태학
상피 유사
종양 유발성
예, 누드 마우스에서

04식별자

인용
CERV-196(사이티온 카탈로그 번호 300291)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_5721

05발현 및 감수성

바이러스
HPV-16 양성
제품
사이토케라틴 8, 18, 비멘틴

06취급 및 배양

배지
DMEM:햄의 F12(1:1), w: 3.1 g/L 포도당, w: 2.5mM L-글루타민, w: 15mM HEPES, w: 0.5mM 피루브산 나트륨, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion 제품 번호 820400a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²를 권장합니다
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
49년
민족
아프리카