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CERV-196
ティッシュ
子宮頸部
病気
扁平上皮癌
同義語
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

CERV-196

Cell line · 製品番号 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

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01概要

説明

HPV16陽性子宮頸癌由来のMRI-H196細胞株は、完全長L1転写産物の存在とE5完全長RNAの顕著な欠如を特徴とするユニークなHPV16転写産物発現プロフィールを示す。このパターンは、細胞株内でのHPV16ゲノムの統合を示唆し、特にE2領域に影響を与え、L1 DNA配列の再配列を引き起こしている。E5完全長RNAの発現がないことは、通常E5オープンリーディングフレーム(ORF)の下流に位置するポリアデニル化シグナルで終結する完全長初期RNAの転写が中断していることを示している。このような崩壊は、HPV16ゲノムの統合状態を示しており、ウイルス複製と転写制御の鍵となる重要なE2領域は、宿主ゲノムに統合される過程でしばしば損なわれる。この崩壊は、E5を含む下流遺伝子の発現に影響を与える可能性がある。

MRI-H196細胞におけるこの統合現象は、統合後のHPV16ゲノムの複雑な挙動を浮き彫りにし、子宮頸癌におけるHPV統合に関連するゲノムおよび転写の複雑さを研究する上で、この細胞株が有用であることを強調している。このような動態を理解することは、発癌メカニズムやHPV関連癌の進行に関する洞察にとって極めて重要であり、MRI-H196細胞株は医学・生物学研究にとって貴重なリソースとなる。

ティッシュ
子宮頸部
病気
扁平上皮癌
同義語
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで

04識別子

引用
CERV-196 (Cytion カタログ番号 300291)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_5721

05発現と感受性

ウイルス
HPV-16陽性
製品
サイトケラチン8、18、ビメンチン

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
10⁴細胞/cm²が推奨されます
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
49年
民族
アフリカ人