Μετάβαση στο περιεχόμενο
CERV-196
Ιστός
Τράχηλος μήτρας
Ασθένεια
Καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων
Συνώνυμα
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Έγγραφα

CERV-196

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά MRI-H196, προερχόμενη από HPV16-θετικό καρκίνωμα του τραχήλου της μήτρας, εμφανίζει ένα μοναδικό προφίλ έκφρασης των μεταγράφων του HPV16 που χαρακτηρίζεται από την παρουσία του μεταγράφου L1 πλήρους μήκους και τη σημαντική απουσία του RNA πλήρους μήκους E5. Το πρότυπο αυτό υποδηλώνει την ενσωμάτωση του γονιδιώματος του HPV16 εντός της κυτταρικής σειράς, επηρεάζοντας ιδιαίτερα την περιοχή Ε2 και προκαλώντας αναδιάταξη της αλληλουχίας L1 DNA. Η απουσία έκφρασης του RNA πλήρους μήκους E5 υποδηλώνει διαταραχή στη μεταγραφή των πρώιμων RNA πλήρους μήκους, τα οποία συνήθως καταλήγουν στο σήμα πολυαδενυλίωσης που βρίσκεται κατάντη του ανοικτού πλαισίου ανάγνωσης (ORF) του E5. Μια τέτοια διαταραχή είναι ενδεικτική της ολοκληρωμένης κατάστασης των γονιδιωμάτων του HPV16, όπου η κρίσιμη περιοχή Ε2 -κλειδί για την αντιγραφή του ιού και τη ρύθμιση της μεταγραφής- συχνά διακυβεύεται κατά την ενσωμάτωση στο γονιδίωμα του ξενιστή. Η διαταραχή αυτή επηρεάζει ενδεχομένως την έκφραση των γονιδίων που ακολουθούν, συμπεριλαμβανομένου του Ε5.

Αυτό το φαινόμενο ενσωμάτωσης εντός των κυττάρων MRI-H196 αναδεικνύει την πολυπλοκότητα της συμπεριφοράς του γονιδιώματος του HPV16 μετά την ενσωμάτωση, τονίζοντας τη χρησιμότητα της κυτταρικής σειράς στη μελέτη των γονιδιωματικών και μεταγραφικών περιπλοκών που σχετίζονται με την ενσωμάτωση του HPV στα καρκινώματα του τραχήλου της μήτρας. Η κατανόηση αυτών των δυναμικών είναι ζωτικής σημασίας για την κατανόηση των μηχανισμών ογκογένεσης και της εξέλιξης των καρκίνων που σχετίζονται με τον HPV, καθιστώντας την κυτταρική σειρά MRI-H196 πολύτιμη πηγή για την ιατρική και βιολογική έρευνα.

Ιστός
Τράχηλος μήτρας
Ασθένεια
Καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων
Συνώνυμα
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
CERV-196 (αριθμός καταλόγου Cytion 300291)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_5721

05Έκφραση και ευαισθησία

Ιοί
HPV-16 θετικό
Προϊόντα
Κυτταροκερατίνη 8, 18, βιμεντίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
Συνιστάται 1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
49 χρόνια
Εθνικότητα
Αφρικανική