Prejsť na obsah
CERV-196
Tkanivo
Cervix
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumenty

CERV-196

Cell line · Číslo výrobku 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia MRI-H196 odvodená od HPV16-pozitívneho karcinómu krčka maternice vykazuje jedinečný profil expresie transkriptu HPV16 charakterizovaný prítomnosťou transkriptu L1 v plnej dĺžke a výraznou absenciou RNA E5 v plnej dĺžke. Tento vzor naznačuje integráciu genómu HPV16 v bunkovej línii, ktorá ovplyvňuje najmä oblasť E2 a spôsobuje preskupenie sekvencie DNA L1. Absencia expresie RNA E5 v plnej dĺžke naznačuje narušenie transkripcie včasných RNA v plnej dĺžke, ktorá sa zvyčajne končí pri polyadenylačnom signáli nachádzajúcom sa za otvoreným čítacím rámcom (ORF) E5. Takéto narušenie svedčí o integrovanom stave genómov HPV16, kde je kľúčová oblasť E2 - kľúčová pre vírusovú replikáciu a reguláciu transkripcie - často narušená počas integrácie do genómu hostiteľa. Toto narušenie potenciálne ovplyvňuje expresiu nadväzujúcich génov vrátane E5.

Tento fenomén integrácie v bunkách MRI-H196 poukazuje na zložitosť správania sa genómu HPV16 po integrácii a zdôrazňuje užitočnosť bunkovej línie pri štúdiu genomických a transkripčných zložitostí spojených s integráciou HPV v karcinómoch krčka maternice. Pochopenie tejto dynamiky je kľúčové pre pochopenie mechanizmov onkogenézy a progresie rakoviny spojenej s HPV, vďaka čomu je bunková línia MRI-H196 cenným zdrojom pre lekársky a biologický výskum.

Tkanivo
Cervix
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach

04Identifikátory

Citácia
CERV-196 (katalógové číslo Cytion 300291)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
HPV-16 pozitívny
Produkty
Cytokeratín 8, 18, Vimentín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
Odporúča sa 1 x 104 buniek/cm2.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
49 rokov
Etnická príslušnosť
African