CERV-196

La lignée cellulaire MRI-H196, dérivée d’un carcinome cervical positif au VPH16, présente un profil d’expression des transcrits du VPH16 unique, caractérisé par la présence du transcrit L1 complet et une absence marquée de l’ARN E5 complet. Ce profil suggère une intégration du génome du VPH16 au sein de la lignée cellulaire, affectant particulièrement la région E2 et provoquant un réarrangement de la séquence d’ADN de L1. L’absence d’expression de l’ARN complet de E5 indique une perturbation de la transcription des ARN précoces complets, qui se terminent habituellement au niveau du signal de polyadénylation situé en aval du cadre de lecture ouvert (ORF) de E5. Une telle perturbation est révélatrice de l’état d’intégration des génomes du VPH16, où la région E2 cruciale — essentielle à la réplication virale et à la régulation de la transcription — est souvent compromise lors de l’intégration dans le génome de l’hôte. Cette perturbation peut avoir une incidence sur l’expression des gènes en aval, y compris le gène E5.

Ce phénomène d’intégration au sein des cellules MRI-H196 met en évidence la complexité du comportement du génome du VPH16 après l’intégration, soulignant ainsi l’utilité de cette lignée cellulaire pour l’étude des subtilités génomiques et transcriptionnelles associées à l’intégration du VPH dans les carcinomes du col de l’utérus. La compréhension de ces dynamiques est essentielle pour mieux cerner les mécanismes de l’oncogenèse et la progression des cancers associés au VPH, ce qui fait de la lignée cellulaire MRI-H196 une ressource précieuse pour la recherche médicale et biologique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.