CERV-196

Die Zelllinie MRI-H196, die von HPV16-positiven Gebärmutterhalskrebsen stammt, weist ein einzigartiges HPV16-Transkript-Expressionsprofil auf, das durch das Vorhandensein des L1-Transkripts in voller Länge und ein deutliches Fehlen der E5-RNA in voller Länge gekennzeichnet ist. Dieses Muster deutet auf eine Integration des HPV16-Genoms in die Zelllinie hin, wobei insbesondere die E2-Region betroffen ist und die L1-DNA-Sequenz neu angeordnet wird. Das Fehlen der Expression der E5-Volllängen-RNA deutet auf eine Störung der Transkription der frühen Volllängen-RNAs hin, die typischerweise am Polyadenylierungssignal endet, das sich stromabwärts des offenen Leserahmens (ORF) von E5 befindet. Eine solche Unterbrechung ist ein Hinweis auf den integrierten Zustand von HPV16-Genomen, bei dem die entscheidende E2-Region - der Schlüssel für die virale Replikation und Transkriptionsregulation - während der Integration in das Wirtsgenom häufig beeinträchtigt ist. Diese Störung hat möglicherweise Auswirkungen auf die Expression nachgeschalteter Gene, einschließlich E5.

Dieses Integrationsphänomen in MRI-H196-Zellen verdeutlicht die Komplexität des HPV16-Genomverhaltens nach der Integration und unterstreicht den Nutzen der Zelllinie bei der Untersuchung der genomischen und transkriptionellen Feinheiten, die mit der HPV-Integration in Gebärmutterhalskrebs verbunden sind. Das Verständnis dieser Dynamik ist entscheidend für die Erforschung der Mechanismen der Onkogenese und des Fortschreitens von HPV-assoziierten Krebserkrankungen und macht die MRI-H196-Zelllinie zu einer wertvollen Ressource für die medizinische und biologische Forschung.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung