Pereiti prie turinio
CERV-196
Audinys
Gimdos kaklelis
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumentai

CERV-196

Cell line · Prekės numeris 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MRI-H196 ląstelių linijai, gautai iš ŽPV16 teigiamos gimdos kaklelio karcinomos, būdingas unikalus ŽPV16 transkriptų raiškos profilis, kuriam būdingas pilno ilgio L1 transkriptas ir akivaizdus E5 pilno ilgio RNR nebuvimas. Šis modelis rodo ŽPV16 genomo integraciją ląstelių linijoje, ypač paveikiančią E2 sritį ir sukeliančią L1 DNR sekos pertvarkymą. E5 pilno ilgio RNR raiškos nebuvimas rodo, kad sutriko ankstyvųjų pilno ilgio RNR transkripcija, kuri paprastai baigiasi ties poliadenilinimo signalu, esančiu už E5 atvirojo skaitymo rėmelio (ORF). Toks sutrikimas rodo integruotą ŽPV16 genomo būklę, kai integruojantis į šeimininko genomą dažnai pažeidžiama esminė E2 sritis - viruso replikacijos ir transkripcijos reguliavimo raktas. Šis sutrikimas gali turėti įtakos tolesnių genų, įskaitant E5, raiškai.

Šis integracijos reiškinys MRI-H196 ląstelėse išryškina sudėtingą ŽPV16 genomo elgseną po integracijos, pabrėžiant ląstelių linijos naudingumą tiriant genomo ir transkripcijos subtilybes, susijusias su ŽPV integracija gimdos kaklelio karcinomose. Šios dinamikos supratimas yra labai svarbus norint suprasti onkogenezės mechanizmus ir su ŽPV susijusių vėžinių susirgimų progresavimą, todėl MRI-H196 ląstelių linija yra vertingas medicinos ir biologijos tyrimų šaltinis.

Audinys
Gimdos kaklelis
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
CERV-196 (Cytion katalogo numeris 300291)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
ŽPV-16 teigiamas
Produktai
Citokeratinas 8, 18, vimentinas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
Rekomenduojama 1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
49 metai
Etninė priklausomybė
Afrikos