CERV-196

La línea celular MRI-H196, derivada de un carcinoma cervical positivo para el VPH16, presenta un perfil de expresión de transcritos del VPH16 único, caracterizado por la presencia del transcrito L1 de longitud completa y una marcada ausencia del ARN de longitud completa de E5. Este patrón sugiere una integración del genoma del VPH16 dentro de la línea celular, lo que afecta particularmente a la región E2 y provoca una reorganización de la secuencia de ADN de L1. La ausencia de expresión del ARN de longitud completa de E5 indica una interrupción en la transcripción de los ARN tempranos de longitud completa, que normalmente concluyen en la señal de poliadenilación ubicada aguas abajo del marco de lectura abierto (ORF) de E5. Dicha interrupción es indicativa del estado integrado de los genomas del VPH16, en el que la región E2 —crucial para la replicación viral y la regulación de la transcripción— a menudo se ve comprometida durante la integración en el genoma del huésped. Esta interrupción podría afectar la expresión de los genes situados más abajo en la cadena, incluido el E5.

Este fenómeno de integración en las células MRI-H196 pone de relieve la complejidad del comportamiento del genoma del VPH16 tras la integración, lo que resalta la utilidad de esta línea celular para estudiar las complejidades genómicas y transcripcionales asociadas con la integración del VPH en los carcinomas cervicales. Comprender estas dinámicas es crucial para conocer los mecanismos de la oncogénesis y la progresión de los cánceres asociados al VPH, lo que convierte a la línea celular MRI-H196 en un recurso valioso para la investigación médica y biológica.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.