Mine otse sisu juurde
CERV-196
Kude
Emakakael
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumendid

CERV-196

Cell line · Toote number 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MRI-H196 rakuliinil, mis on saadud HPV16-positiivsest emakakaela kartsinoomist, on ainulaadne HPV16 transkripti ekspressiooniprofiil, mida iseloomustab täispika L1 transkripti olemasolu ja E5 täispika RNA märgatav puudumine. See muster viitab HPV16 genoomi integratsioonile rakuliinis, mis mõjutab eelkõige E2 piirkonda ja põhjustab L1 DNA järjestuse ümberpaigutamist. E5 täispika RNA ekspressiooni puudumine viitab täispika varase RNA transkriptsiooni häirele, mis tavaliselt lõpeb E5 avatud lugemisraamistiku (ORF) allavoolu asuva polüadenüülimissignaali juures. Selline katkestus viitab HPV16 genoomi integreeritud olekusse, kus oluline E2 piirkond - mis on viiruse replikatsiooni ja transkriptsiooni reguleerimise võtmeks - on sageli kahjustatud peremeesgenoomi integreerumise ajal. See häire võib mõjutada järgnevate geenide, sealhulgas E5 ekspressiooni.

See integratsiooninähtus MRI-H196 rakkudes rõhutab HPV16 genoomi käitumise keerukust pärast integratsiooni, rõhutades rakuliini kasulikkust HPV integratsiooniga seotud genoomiliste ja transkriptsiooniliste keerukuste uurimisel emakakaela kartsinoomides. Selle dünaamika mõistmine on oluline, et mõista onkogeneesi mehhanisme ja HPV-ga seotud vähkkasvajate progresseerumist, mistõttu on MRI-H196 rakuliin väärtuslik ressurss meditsiinilisteks ja bioloogilisteks uuringuteks.

Kude
Emakakael
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
CERV-196 (Cytioni katalooginumber 300291)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
HPV-16 positiivne
Tooted
Tsütokeratiin 8, 18, vimentiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav on 1 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
49 aastat
Etniline kuuluvus
Aafrika