Gå direkte til indholdet
CERV-196
Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumenter

CERV-196

Cell line · Varenummer 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MRI-H196-cellelinjen, der stammer fra HPV16-positiv livmoderhalskræft, viser en unik HPV16-transkript-ekspressionsprofil, der er karakteriseret ved tilstedeværelsen af L1-transkriptet i fuld længde og et markant fravær af E5-RNA i fuld længde. Dette mønster tyder på en integration af HPV16-genomet i cellelinjen, der især påvirker E2-regionen og forårsager omlejring af L1-DNA-sekvensen. Fraværet af E5 RNA-ekspression i fuld længde indikerer en forstyrrelse i transskriptionen af tidlige RNA'er i fuld længde, som typisk slutter ved polyadenyleringssignalet, der ligger nedstrøms for E5's åbne læseramme (ORF). En sådan forstyrrelse er et tegn på den integrerede tilstand af HPV16-genomer, hvor den afgørende E2-region - nøglen til viral replikation og transkriptionsregulering - ofte kompromitteres under integrationen i værtsgenomet. Denne forstyrrelse påvirker potentielt udtrykket af downstream-gener, herunder E5.

Dette integrationsfænomen i MRI-H196-celler fremhæver kompleksiteten i HPV16-genomets opførsel efter integration og understreger cellelinjens anvendelighed til at studere de genomiske og transkriptionelle forviklinger, der er forbundet med HPV-integration i livmoderhalskræftkarcinomer. At forstå denne dynamik er afgørende for at få indsigt i mekanismerne for onkogenese og udviklingen af HPV-associerede kræftformer, hvilket gør MRI-H196-cellelinjen til en værdifuld ressource for medicinsk og biologisk forskning.

Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CERV-196 (Cytion katalognummer 300291)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Udtryk og modtagelighed

Vira
HPV-16 positiv
Produkter
Cytokeratin 8, 18, Vimentin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 anbefales
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
49 år
Etnisk tilhørsforhold
Afrikansk