Gå direkt till innehållet
CERV-196
Vävnad
Cervix
Sjukdom
Skivepitelcancer
Synonymer
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

CERV-196

Cell line · Produktnummer 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen MRI-H196, som härrör från HPV16-positivt cervixkarcinom, uppvisar en unik HPV16-transkriptuttrycksprofil som kännetecknas av närvaron av L1-transkriptet i full längd och en markant frånvaro av E5-RNA i full längd. Detta mönster tyder på en integration av HPV16-genomet i cellinjen, vilket särskilt påverkar E2-regionen och orsakar omarrangemang av L1 DNA-sekvensen. Frånvaron av uttryck av fullängds-RNA E5 indikerar en störning i transkriptionen av tidiga fullängds-RNA, som vanligtvis avslutas vid polyadenyleringssignalen nedströms från den öppna läsramen (ORF) för E5. En sådan störning är ett tecken på det integrerade tillståndet hos HPV16-genom, där den avgörande E2-regionen - nyckeln till viral replikation och transkriptionsreglering - ofta äventyras under integrationen i värdgenomet. Denna störning påverkar potentiellt uttrycket av gener nedströms, inklusive E5.

Detta integrationsfenomen i MRI-H196-celler belyser komplexiteten i HPV16-genomets beteende efter integration, vilket understryker cellinjens användbarhet för att studera de genomiska och transkriptionella komplikationer som är förknippade med HPV-integration i livmoderhalscancer. Att förstå denna dynamik är avgörande för att få insikter i mekanismerna bakom onkogenes och utvecklingen av HPV-associerade cancerformer, vilket gör MRI-H196-cellinjen till en värdefull resurs för medicinsk och biologisk forskning.

Vävnad
Cervix
Sjukdom
Skivepitelcancer
Synonymer
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss

04Identifierare

Källa
CERV-196 (Cytion katalognummer 300291)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Uttryck och mottaglighet

Virus
HPV-16 positiv
Produkter
Cytokeratin 8, 18, Vimentin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2 rekommenderas
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
49 år
Etnicitet
Afrikanska