İçeriğe atla
CERV-196
Doku
Serviks
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

CERV-196

Cell line · Ürün numarası 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HPV16-pozitif servikal karsinomdan türetilen MRI-H196 hücre hattı, tam uzunlukta L1 transkriptinin varlığı ve E5 tam uzunlukta RNA'nın belirgin yokluğu ile karakterize benzersiz bir HPV16 transkript ekspresyon profili sergilemektedir. Bu model, özellikle E2 bölgesini etkileyen ve L1 DNA dizisinin yeniden düzenlenmesine neden olan HPV16 genomunun hücre hattına entegrasyonunu göstermektedir. E5 tam uzunlukta RNA ifadesinin yokluğu, tipik olarak E5 açık okuma çerçevesinin (ORF) aşağı akışında bulunan poliadenilasyon sinyalinde sonlanan tam uzunlukta erken RNA'ların transkripsiyonunda bir bozulmaya işaret eder. Böyle bir bozulma, viral replikasyon ve transkripsiyon düzenlemesi için anahtar olan önemli E2 bölgesinin konak genomuna entegrasyon sırasında sıklıkla tehlikeye girdiği HPV16 genomlarının entegre durumunun göstergesidir. Bu bozulma, E5 de dahil olmak üzere aşağı akış genlerinin ifadesini potansiyel olarak etkiler.

MRI-H196 hücrelerindeki bu entegrasyon fenomeni, entegrasyon sonrası HPV16 genom davranışının karmaşıklığını vurgulamakta ve hücre hattının servikal karsinomlarda HPV entegrasyonu ile ilişkili genomik ve transkripsiyonel karmaşıklıkları incelemedeki faydasını vurgulamaktadır. Bu dinamiklerin anlaşılması, onkogenez mekanizmalarının ve HPV ile ilişkili kanserlerin ilerlemesinin anlaşılması için çok önemlidir ve MRI-H196 hücre hattını tıbbi ve biyolojik araştırmalar için değerli bir kaynak haline getirmektedir.

Doku
Serviks
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CERV-196 (Cytion katalog numarası 300291)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
HPV-16 pozitif
Ürünler
Sitokeratin 8, 18, Vimentin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2 önerilir
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
49 yıl
Etnik köken
Afrika