Tartalomra ugrás
CERV-196
Szövet
Cervix
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumentumok

CERV-196

Cell line · Termékszám 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HPV16-pozitív méhnyakrákból származó MRI-H196 sejtvonal egyedi HPV16 transzkript expressziós profilt mutat, amelyet a teljes hosszúságú L1 transzkript jelenléte és az E5 teljes hosszúságú RNS kifejezett hiánya jellemez. Ez a mintázat a HPV16 genomnak a sejtvonalon belüli integrációjára utal, amely különösen az E2 régiót érinti, és az L1 DNS-szekvencia átrendeződését okozza. Az E5 teljes hosszúságú RNS expressziójának hiánya a teljes hosszúságú korai RNS-ek transzkripciójának zavarára utal, amely jellemzően az E5 nyílt olvasási keret (ORF) után elhelyezkedő poliadenilációs jelnél végződik. Ez a zavar a HPV16 genomok integrált állapotát jelzi, ahol a vírus replikációjához és a transzkripció szabályozásához kulcsfontosságú E2 régió gyakran sérül a gazdagenomba való integráció során. Ez a zavar potenciálisan befolyásolja a downstream gének, köztük az E5 gének kifejeződését.

Az MRI-H196 sejteken belüli integrációs jelenség rávilágít a HPV16 genom integráció utáni viselkedésének komplexitására, hangsúlyozva a sejtvonal hasznosságát a HPV-integrációval kapcsolatos genomikai és transzkripciós bonyodalmak tanulmányozásában a méhnyakrákokban. E dinamikák megértése kulcsfontosságú az onkogenezis mechanizmusainak és a HPV-asszociált rákok progressziójának megismeréséhez, ami az MRI-H196 sejtvonalat értékes forrássá teszi az orvosi és biológiai kutatások számára.

Szövet
Cervix
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
CERV-196 (Cytion katalógusszám: 300291)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
HPV-16 pozitív
Termékek
Cytokeratin 8, 18, Vimentin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 ajánlott
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
49 év
Etnikai hovatartozás
Afrikai