Pāriet uz saturu
CERV-196
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumenti

CERV-196

Cell line · Preces numurs 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MRI-H196 šūnu līnija, kas iegūta no HPV16 pozitīvas dzemdes kakla karcinomas, uzrāda unikālu HPV16 transkripta ekspresijas profilu, ko raksturo pilna garuma L1 transkripta klātbūtne un izteikta E5 pilna garuma RNS neesamība. Šis modelis liecina par HPV16 genoma integrāciju šūnu līnijā, jo īpaši ietekmējot E2 reģionu un izraisot L1 DNS sekvences pārkārtošanos. E5 pilna garuma RNS ekspresijas trūkums norāda uz agrīno pilna garuma RNS transkripcijas traucējumiem, kas parasti beidzas pie poliadenilācijas signāla, kurš atrodas aiz E5 atvērtā lasīšanas rāmja (ORF). Šāds traucējums liecina par HPV16 genomu integrācijas stāvokli, kad vīrusa replikācijai un transkripcijas regulēšanai būtiskais E2 reģions bieži vien ir bojāts integrācijas saimnieka genomā laikā. Šis traucējums potenciāli ietekmē pakārtoto gēnu, tostarp E5, ekspresiju.

Šis integrācijas fenomens MRI-H196 šūnās izceļ HPV16 genoma uzvedības sarežģītību pēc integrācijas, uzsverot šūnu līnijas lietderību genoma un transkripcijas intrigu, kas saistītas ar HPV integrāciju dzemdes kakla karcinomās, pētniecībā. Šīs dinamikas izpratne ir ļoti svarīga, lai izprastu onkoģenēzes mehānismus un ar HPV saistītu vēža progresēšanu, padarot MRI-H196 šūnu līniju par vērtīgu resursu medicīnas un bioloģijas pētījumiem.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
CERV-196 (Cytion kataloga numurs 300291)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
HPV-16 pozitīvs
Produkti
Citokeratīns 8, 18, vimentīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Ieteicams 1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
49 gadi
Etniskā piederība
Āfrikas