Preskoči na vsebino
CERV-196
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Dokumenti

CERV-196

Cell line · Številka izdelka 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MRI-H196, pridobljena iz HPV16-pozitivnega karcinoma materničnega vratu, ima edinstven profil izražanja zapisa HPV16, za katerega je značilna prisotnost zapisa L1 v polni dolžini in izrazita odsotnost RNA E5 v polni dolžini. Ta vzorec kaže na integracijo genoma HPV16 v celično linijo, ki vpliva zlasti na regijo E2 in povzroča preureditev zaporedja DNA L1. Odsotnost izražanja RNA polne dolžine E5 kaže na motnje v prepisovanju zgodnjih RNA polne dolžine, ki se običajno končajo na poliadenilacijskem signalu, ki se nahaja za odprtim bralnim okvirom (ORF) E5. Takšna motnja kaže na integrirano stanje genomov HPV16, kjer je ključna regija E2 - ključna za virusno replikacijo in regulacijo transkripcije - med integracijo v genom gostitelja pogosto okrnjena. Ta motnja lahko vpliva na izražanje nadaljnjih genov, vključno z E5.

Ta pojav integracije v celicah MRI-H196 poudarja kompleksnost obnašanja genoma HPV16 po integraciji in poudarja uporabnost celične linije pri preučevanju genomskih in transkripcijskih zapletov, povezanih z integracijo HPV v karcinome materničnega vratu. Razumevanje te dinamike je ključno za vpogled v mehanizme onkogeneze in napredovanja rakov, povezanih s HPV, zato je celična linija MRI-H196 dragocen vir za medicinske in biološke raziskave.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
CERV-196 (kataloška številka Cytion 300291)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
HPV-16 pozitiven
Izdelki
Citokeratin 8, 18, vimentin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
Priporočljivo je 1 x 104 celic/cm2.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
49 let
Etnična pripadnost
Afriški