.jpg)
- Tkivo
- Maternični vrat
- Bolezen
- Ploščatocelični karcinom
- Sinonimi
- Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196
Dokumenti
CERV-196
Cell line · Številka izdelka 300291
The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...
Prilagajanje / Priporočila
- CERV-196Cell line€800.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija MRI-H196, pridobljena iz HPV16-pozitivnega karcinoma materničnega vratu, ima edinstven profil izražanja zapisa HPV16, za katerega je značilna prisotnost zapisa L1 v polni dolžini in izrazita odsotnost RNA E5 v polni dolžini. Ta vzorec kaže na integracijo genoma HPV16 v celično linijo, ki vpliva zlasti na regijo E2 in povzroča preureditev zaporedja DNA L1. Odsotnost izražanja RNA polne dolžine E5 kaže na motnje v prepisovanju zgodnjih RNA polne dolžine, ki se običajno končajo na poliadenilacijskem signalu, ki se nahaja za odprtim bralnim okvirom (ORF) E5. Takšna motnja kaže na integrirano stanje genomov HPV16, kjer je ključna regija E2 - ključna za virusno replikacijo in regulacijo transkripcije - med integracijo v genom gostitelja pogosto okrnjena. Ta motnja lahko vpliva na izražanje nadaljnjih genov, vključno z E5.
Ta pojav integracije v celicah MRI-H196 poudarja kompleksnost obnašanja genoma HPV16 po integraciji in poudarja uporabnost celične linije pri preučevanju genomskih in transkripcijskih zapletov, povezanih z integracijo HPV v karcinome materničnega vratu. Razumevanje te dinamike je ključno za vpogled v mehanizme onkogeneze in napredovanja rakov, povezanih s HPV, zato je celična linija MRI-H196 dragocen vir za medicinske in biološke raziskave.
- Tkivo
- Maternični vrat
- Bolezen
- Ploščatocelični karcinom
- Sinonimi
- Cerv-196
- MRI-H-196
- MRI-H196
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 2
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Tumorigeničen
- Da, na golih miših
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- CERV-196 (kataloška številka Cytion 300291)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5721
05Izražanje in dovzetnost
- Virusi
- HPV-16 pozitiven
- Izdelki
- Citokeratin 8, 18, vimentin
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Gostota setve
- Priporočljivo je 1 x 104 celic/cm2.
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 49 let
- Etnična pripadnost
- Afriški
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da