CERV-196

A linha celular MRI-H196, derivada de carcinoma cervical HPV16-positivo, apresenta um perfil de expressão de transcritos HPV16 único, caracterizado pela presença do transcrito L1 completo e uma ausência marcada do ARN E5 completo. Este padrão sugere uma integração do genoma do HPV16 na linha celular, afectando particularmente a região E2 e causando um rearranjo da sequência de ADN L1. A ausência de expressão do ARN completo E5 indica uma perturbação na transcrição de ARNs precoces completos, que normalmente terminam no sinal de poliadenilação localizado a jusante do quadro de leitura aberta (ORF) E5. Esta perturbação é indicativa do estado integrado dos genomas do HPV16, em que a região E2 crucial - chave para a replicação viral e regulação da transcrição - é frequentemente comprometida durante a integração no genoma do hospedeiro. Esta perturbação tem potencialmente impacto na expressão de genes a jusante, incluindo o E5.

Este fenómeno de integração nas células MRI-H196 realça a complexidade do comportamento do genoma do HPV16 após a integração, enfatizando a utilidade da linha celular no estudo das complexidades genómicas e transcricionais associadas à integração do HPV nos carcinomas cervicais. A compreensão desta dinâmica é crucial para a compreensão dos mecanismos de oncogénese e da progressão dos cancros associados ao HPV, tornando a linha celular MRI-H196 um recurso valioso para a investigação médica e biológica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia