Skip to content
CERV-196
Tissue
צוואר הרחם
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
Cerv-196, MRI-H-196, MRI-H196

Documents

CERV-196

Cell line · Product number 300291

The MRI-H196 cell line, derived from HPV16-positive cervical carcinoma, displays a unique HPV16 transcript expression profile characterized by the presenc...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים MRI-H196, שמקורו בקרצינומה צוואר הרחם חיובית ל-HPV16, מציג פרופיל ביטוי ייחודי של HPV16 המאופיין בנוכחות של תעתיק L1 באורך מלא ובהיעדרות בולטת של RNA E5 באורך מלא. דפוס זה מצביע על שילוב של הגנום HPV16 בתוך קו התאים, המשפיע במיוחד על אזור E2 וגורם לשינוי בסדר הרצף של ה-DNA L1. היעדר ביטוי RNA באורך מלא של E5 מצביע על שיבוש בתעתוק של RNAs מוקדמים באורך מלא, אשר מסתיימים בדרך כלל באות הפוליאדנילציה הממוקמת במורד הזרם של מסגרת הקריאה הפתוחה (ORF) של E5. שיבוש זה מעיד על מצב משולב של גנומי HPV16, שבו אזור E2 הקריטי - המפתח לשכפול נגיפי ולוויסות שעתוק - נפגע לעתים קרובות במהלך השילוב בגנום המארח. שיבוש זה עשוי להשפיע על הביטוי של גנים במורד הזרם, כולל E5.

תופעת האינטגרציה בתאי MRI-H196 מדגישה את המורכבות של התנהגות גנום HPV16 לאחר האינטגרציה, ומדגישה את התועלת של קו התאים בחקר המורכבות הגנומית והתעתוקית הקשורה לאינטגרציה של HPV בקרצינומות צוואר הרחם. הבנת הדינמיקה הזו היא חיונית להבנת המנגנונים של אונקוגנזה והתקדמות של סוגי סרטן הקשורים ל-HPV, מה שהופך את קו התאים MRI-H196 למשאב יקר ערך למחקר רפואי וביולוגי.

Tissue
צוואר הרחם
Disease
קרצינומה של תאי קשקש
Synonyms
  • Cerv-196
  • MRI-H-196
  • MRI-H196

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים

04Identifiers

Citation
CERV-196 (מספר קטלוגי Cytion 300291)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5721

05Expression and susceptibility

Viruses
חיובי ל-HPV-16
Products
ציטוקרטין 8, 18, וימנטין

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
מומלץ 1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
49 שנים
Ethnicity
אפריקאי