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K7M2 wt-Luc
Tissu
Ascite
Maladie
Ostéosarcome de souris
Site métastatique
Poumon
Synonymes
K7M2-WT, K7M2

Documents

K7M2 wt-Luc

Cell line · Référence du produit 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée K7M2 wt-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire murine d'ostéosarcome K7M2, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale K7M2 a été établie à partir de l'ascite d'un ostéosarcome spontané chez une souris BALB/c ; elle se caractérise par une morphologie ostéoblastique et un fort potentiel métastatique, en particulier vers les poumons. K7M2 est l’un des rares modèles syngéniques d’ostéosarcome disponibles sur fond BALB/c, ce qui en fait un outil précieux pour l’étude de la biologie de l’ostéosarcome, des interactions entre la tumeur et le système immunitaire, ainsi que pour l’évaluation des stratégies d’immunothérapie chez un hôte immunocompétent.

L’intégration stable de la luciférase dans la lignée K7M2 wt-Luc permet une imagerie par bioluminescence (BLI) sensible et non invasive de la croissance de la tumeur primaire et de la propagation des métastases pulmonaires chez des souris BALB/c syngéniques. Après administration du substrat luciférine, le signal émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal de la prise de greffe tumorale, de la colonisation métastatique et de la réponse thérapeutique sans recourir à des procédures invasives à chaque point de temps. Cela rend la lignée K7M2 wt-Luc particulièrement adaptée aux études précliniques évaluant des agents antitumoraux et antimétastatiques, des inhibiteurs de points de contrôle et des stratégies de traitement combiné dans l’ostéosarcome.

K7M2 wt-Luc conserve les propriétés biologiques et immunologiques de la lignée parentale K7M2, notamment l’expression du composant C3 du complément et du récepteur Fc gamma I (FcgRI), caractéristiques susceptibles d’influencer les interactions avec le système immunitaire inné. Le rapporteur luciférase améliore considérablement la flexibilité expérimentale et la sensibilité pour le suivi en temps réel de la progression tumorale. Les chercheurs doivent valider l’activité de la luciférase, la cinétique de croissance et le comportement métastatique dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation in vivo à grande échelle.

Tissu
Ascite
Maladie
Ostéosarcome de souris
Site métastatique
Poumon
Applications
Recherche sur l'ostéosarcome ; modèle tumoral syngénique BALB/c ; imagerie des métastases pulmonaires par bioluminescence ; évaluation de médicaments antitumoraux et antimétastatiques ; essais sur les inhibiteurs de points de contrôle ; études sur les interactions avec le système immunitaire inné (C3, FcgRI) ; immunothérapie du cancer des os chez l'enfant
Synonymes
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Type de cellule
Ostéoblaste
Tumorigène
Oui

04Identifiants

Référence
K7M2 wt-Luc (référence Cytion 305684)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Complément (C3), exprimé, Récepteur Fc, IgG, haute affinité I (Fcgr1), exprimé
Expression des antigènes
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
1-3 × 10⁴/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c
Âge du donneur
895 jours