Gå til innholdet
K7M2 wt-Luc
Vev
Ascites
Sykdom
Osteosarkom hos mus
Metastaseområde
Lunge
Synonymer
K7M2-WT, K7M2

Dokumenter

K7M2 wt-Luc

Cell line · Produktnummer 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

K7M2 wt-Luc er et bioluminescerende derivat av den murine K7M2-osteosarkomcellelinjen, som er genetisk modifisert til å uttrykke et reportergen for ildflue-luciferase på en stabil måte. Den opprinnelige K7M2-cellelinjen ble etablert fra ascites fra et spontant osteosarkom hos en BALB/c-mus og er preget av osteoblastisk morfologi og høyt metastatisk potensial, særlig til lungene. K7M2 er en av de få syngene osteosarkommodellene som er tilgjengelige med BALB/c-bakgrunn, noe som gjør den til et verdifullt verktøy for å studere osteosarkombiologi, interaksjoner mellom svulst og immunsystemet og evaluering av immunterapistrategier i en immunkompetent vert.

Den stabile luciferase-integrasjonen i K7M2 wt-Luc muliggjør sensitiv, ikke-invasiv bioluminescensavbildning (BLI) av primær tumorvekst og metastatisk spredning til lungene hos syngene BALB/c-mus. Etter administrering av luciferinsubstratet korrelerer det utsendte signalet med antall levedyktige tumorceller, noe som muliggjør longitudinell overvåking av tumorinnpodning, metastatisk kolonisering og terapeutisk respons uten invasive inngrep ved hvert tidspunkt. Dette gjør K7M2 wt-Luc spesielt egnet for prekliniske studier som evaluerer antitumor- og antimetastatiske midler, sjekkpunktinhibitorer og kombinasjonsbehandlingsstrategier ved osteosarkom.

K7M2 wt-Luc beholder de biologiske og immunologiske egenskapene til den opprinnelige K7M2-linjen, inkludert uttrykk av komplementkomponent C3 og Fc-gamma-reseptor I (FcgRI), egenskaper som kan påvirke interaksjoner med det medfødte immunforsvaret. Luciferase-reporteren forbedrer eksperimentell fleksibilitet og følsomhet betydelig for sanntidssporing av tumorprogresjon. Forskere bør validere luciferaseaktivitet, vekstkinetikk og metastatisk atferd under sine spesifikke eksperimentelle forhold før storskala in vivo-bruk.

Vev
Ascites
Sykdom
Osteosarkom hos mus
Metastaseområde
Lunge
Søknader
Forskning på osteosarkom; syngenisk BALB/c-tumormodell; avbildning av lungemetastaser ved hjelp av bioluminescens; evaluering av antitumor- og antimetastatiske legemidler; testing av sjekkpunktinhibitorer; studier av interaksjoner i det medfødte immunforsvaret (C3, FcgRI); immunterapi mot beinkreft hos barn
Synonymer
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Osteoblast
Tumorinduserende
Ja

04Identifikatorer

Kildehenvisning
K7M2 wt-Luc (Cytion-katalognummer 305684)
NCBI-skattenummer
10090

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Komplement (C3), uttrykt, Fc-reseptor, IgG, høy affinitet I (Fcgr1), uttrykt
Antigenuttrykk
Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
1–3 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
BALB/c
Donorens alder
895 dager