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K7M2 wt-Luc
Tissue
Ascite
Disease
Osteossarcoma em camundongos
Metastatic site
Pulmão
Synonyms
K7M2-WT, K7M2

Documents

K7M2 wt-Luc

Cell line · Product number 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

US$777.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A K7M2 wt-Luc é um derivado bioluminescente da linhagem celular murina de osteossarcoma K7M2, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de vaga-lume. A linhagem celular parental K7M2 foi estabelecida a partir da ascite de um osteossarcoma espontâneo em um camundongo BALB/c e é caracterizada pela morfologia osteoblástica e alto potencial metastático, particularmente para os pulmões. O K7M2 é um dos poucos modelos singênicos de osteossarcoma disponíveis na linhagem BALB/c, o que o torna uma ferramenta valiosa para o estudo da biologia do osteossarcoma, das interações tumor-imunológicas e da avaliação de estratégias de imunoterapia em um hospedeiro imunocompetente.

A integração estável da luciferase na linha K7M2 wt-Luc permite a imagem por bioluminescência (BLI) sensível e não invasiva do crescimento do tumor primário e da disseminação metastática pulmonar em camundongos BALB/c singênicos. Após a administração do substrato luciferina, o sinal emitido se correlaciona com o número de células tumorais viáveis, possibilitando o monitoramento longitudinal do enxerto tumoral, da colonização metastática e da resposta terapêutica sem a necessidade de procedimentos invasivos em cada momento de avaliação. Isso torna o K7M2 wt-Luc particularmente adequado para estudos pré-clínicos que avaliam agentes antitumorais e antimetastáticos, inibidores de pontos de controle e estratégias de tratamento combinado no osteossarcoma.

O K7M2 wt-Luc mantém as propriedades biológicas e imunológicas da linhagem parental K7M2, incluindo a expressão do componente C3 do complemento e do receptor Fc gama I (FcgRI), características que podem influenciar as interações com o compartimento imunológico inato. O repórter de luciferase aumenta substancialmente a flexibilidade experimental e a sensibilidade para o acompanhamento em tempo real da progressão tumoral. Os pesquisadores devem validar a atividade da luciferase, a cinética de crescimento e o comportamento metastático sob suas condições experimentais específicas antes do uso in vivo em larga escala.

Tissue
Ascite
Disease
Osteossarcoma em camundongos
Metastatic site
Pulmão
Applications
Pesquisa sobre osteossarcoma; modelo tumoral singênico BALB/c; imagem de metástases pulmonares por bioluminescência; avaliação de medicamentos antitumorais e antimetastáticos; testes com inibidores de pontos de controle; estudos de interação do sistema imunológico inato (C3, FcgRI); imunoterapia para câncer ósseo pediátrico
Synonyms
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Osteoblasto
Tumourigenic
Sim

04Identifiers

Citation
K7M2 wt-Luc (número de catálogo da Cytion 305684)
NCBI TaxID
10090

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Complemento (C3), expresso; receptor Fc; IgG; I de alta afinidade (Fcgr1), expresso
Antigen expression
Luc2 (firefly, com otimização de códons)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Split ratio
1 a 3
Seeding density
1-3*10⁴/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
895 dias