Tartalomra ugrás
K7M2 wt-Luc
Szövet
Ascites
Betegség
Egér oszteoszarkóma
Áttétes hely
Tüdő
Szinonimák
K7M2-WT, K7M2

Dokumentumok

K7M2 wt-Luc

Cell line · Termékszám 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A K7M2 wt-Luc az egér K7M2 osteosarcoma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportergént. Az eredeti K7M2 sejtvonalat egy BALB/c egér spontán osteosarcomájából származó ascitesből állították elő, és osteoblastikus morfológiával, valamint magas metasztatikus potenciállal jellemezhető, különösen a tüdőbe történő áttétképződés tekintetében. A K7M2 az egyik kevés, BALB/c háttérben rendelkezésre álló szingén osteosarcoma-modell, ami értékes eszközzé teszi az osteosarcoma biológiájának, a tumor-immunrendszer kölcsönhatásainak tanulmányozásához, valamint az immunkompetens gazdaszervezetben alkalmazott immunterápiás stratégiák értékeléséhez.

A K7M2 wt-Luc-ban lévő stabil luciferáz-integráció lehetővé teszi az elsődleges daganat növekedésének és a tüdőbe történő metasztatikus terjedésnek az érzékeny, nem invazív biolumineszcens képalkotását (BLI) szingén BALB/c egerekben. A luciferin szubsztrát beadása után a kibocsátott jel korrelál az életképes tumorsejtek számával, ami lehetővé teszi a tumor beágyazódásának, a metasztatikus kolonizációnak és a terápiás válasznak az időbeli nyomon követését anélkül, hogy minden időpontban invazív beavatkozásra lenne szükség. Ezért a K7M2 wt-Luc különösen alkalmas az osteosarcomában alkalmazott daganatellenes és metasztázisgátló szerek, ellenőrzőpont-gátlók, valamint kombinált kezelési stratégiák értékelésére irányuló preklinikai vizsgálatokhoz.

A K7M2 wt-Luc megőrzi a szülői K7M2 vonal biológiai és immunológiai tulajdonságait, beleértve a komplement C3 komponens és az Fc-gamma receptor I (FcgRI) expresszióját is – ezek olyan jellemzők, amelyek befolyásolhatják a veleszületett immunrendszerrel való kölcsönhatásokat. A luciferáz-riporter jelentősen növeli a kísérleti rugalmasságot és az érzékenységet a tumorprogresszió valós idejű nyomon követése során. A kutatóknak a nagyszabású in vivo alkalmazás előtt saját kísérleti körülményeik között ellenőrizniük kell a luciferáz-aktivitást, a növekedési kinetikát és a metasztatikus viselkedést.

Szövet
Ascites
Betegség
Egér oszteoszarkóma
Áttétes hely
Tüdő
Alkalmazások
Osteoszarkóma-kutatás; szingén BALB/c tumor modell; pulmonális metasztázisok biolumineszcenciás képalkotása; daganatellenes és metasztázisgátló gyógyszerek értékelése; ellenőrzőpont-gátlók tesztelése; a veleszületett immunrendszer kölcsönhatásainak vizsgálata (C3, FcgRI); gyermekkorú csontdaganatok immunterápiája
Szinonimák
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Osteoblast
Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
K7M2 wt-Luc (Cytion katalógusszám: 305684)
NCBI adóazonosító szám
10090

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Komplement(C3), expresszált, Fc receptor, IgG, nagy affinitású I(Fcgr1), expresszált
Antigén-expresszió
Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
895 nap