Gå direkte til indholdet
K7M2 wt-Luc
Væv
Ascites
Sygdom
Osteosarkom hos mus
Metastasested
Lunge
Synonymer
K7M2-WT, K7M2

Dokumenter

K7M2 wt-Luc

Cell line · Varenummer 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

K7M2 wt-Luc er et bioluminescerende derivat af den murine K7M2-osteosarkomcellelinje, der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke et reportergen baseret på ildflue-luciferase. Den oprindelige K7M2-cellelinje blev etableret ud fra ascites fra et spontant osteosarkom hos en BALB/c-mus og er kendetegnet ved osteoblastisk morfologi og et højt metastatisk potentiale, især til lungerne. K7M2 er en af de få syngene osteosarkommodeller, der findes på BALB/c-baggrund, hvilket gør den til et værdifuldt redskab til at studere osteosarkombiologi, interaktioner mellem tumor og immunsystem samt evaluering af immunterapistrategier i en immunkompetent vært.

Den stabile luciferase-integration i K7M2 wt-Luc muliggør følsom, ikke-invasiv bioluminescensbilleddannelse (BLI) af primær tumorvækst og pulmonal metastatisk spredning i syngene BALB/c-mus. Efter administration af luciferin-substratet korrelerer det udsendte signal med antallet af levedygtige tumorceller, hvilket understøtter langtidsovervågning af tumorimplantation, metastatisk kolonisering og terapeutisk respons uden invasive procedurer på hvert tidspunkt. Dette gør K7M2 wt-Luc særligt velegnet til prækliniske studier, der evaluerer antitumor- og antimetastatiske midler, checkpoint-hæmmere og kombinationsbehandlingsstrategier ved osteosarkom.

K7M2 wt-Luc bevarer de biologiske og immunologiske egenskaber fra den oprindelige K7M2-stamme, herunder ekspression af komplementkomponent C3 og Fc-gamma-receptor I (FcgRI), egenskaber der kan påvirke interaktioner med det medfødte immunsystem. Luciferase-reporteren øger eksperimentel fleksibilitet og følsomhed betydeligt til realtidssporing af tumorprogression. Forskere bør validere luciferaseaktivitet, vækstkinetik og metastatisk adfærd under deres specifikke eksperimentelle betingelser, inden der foretages anvendelse in vivo i stor skala.

Væv
Ascites
Sygdom
Osteosarkom hos mus
Metastasested
Lunge
Anvendelser
Forskning i osteosarkom; syngenisk BALB/c-tumormodel; billeddiagnostik af lungemetastaser ved hjælp af bioluminescens; evaluering af antitumor- og antimetastatiske lægemidler; testning af checkpoint-hæmmere; undersøgelser af interaktioner i det medfødte immunsystem (C3, FcgRI); immunterapi mod knoglekræft hos børn
Synonymer
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Celletype
Osteoblast
Tumorfremkaldende
Yeees

04Identifikatorer

Kildehenvisning
K7M2 wt-Luc (Cytion-katalognummer 305684)
NCBI-skattenummer
10090

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Komplement (C3), udtrykt, Fc-receptor, IgG, høj affinitet I (Fcgr1), udtrykt
Antigenudtryk
Luc2 (ildflue, kodonoptimeret)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
1–3 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
BALB/c
Donorens alder
895 dage