Przejdź do treści
K7M2 wt-Luc
Chusteczka
Wodobrzusze
Choroba
Kostniakomięsak myszy
Miejsce przerzutów
Płuco
Synonimy
K7M2-WT, K7M2

Dokumenty

K7M2 wt-Luc

Cell line · Numer produktu 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

K7M2 wt-Luc to bioluminescencyjna odmiana mysiej linii komórkowej osteosarcoma K7M2, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa K7M2 została wyhodowana z płynu puchlinowego pochodzącego ze spontanicznego osteosarcoma u myszy rasy BALB/c i charakteryzuje się morfologią osteoblastyczną oraz wysokim potencjałem przerzutowym, szczególnie do płuc. K7M2 jest jednym z nielicznych syngenicznych modeli osteosarcoma dostępnych na tle BALB/c, co czyni go cennym narzędziem do badania biologii osteosarcoma, interakcji między nowotworem a układem odpornościowym oraz oceny strategii immunoterapii u gospodarza z prawidłową odpornością.

Stabilna integracja lucyferazy w linii K7M2 wt-Luc umożliwia czułe, nieinwazyjne obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) wzrostu guza pierwotnego oraz rozprzestrzeniania się przerzutów do płuc u myszy syngenicznych rasy BALB/c. Po podaniu substratu lucyferyny emitowany sygnał koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co umożliwia długoterminowe monitorowanie wszczepienia guza, kolonizacji przerzutowej oraz odpowiedzi na leczenie bez konieczności wykonywania zabiegów inwazyjnych w poszczególnych punktach czasowych. To sprawia, że linia K7M2 wt-Luc nadaje się szczególnie do badań przedklinicznych oceniających środki przeciwnowotworowe i przeciwprzerzutowe, inhibitory punktów kontrolnych oraz strategie leczenia skojarzonego w przypadku osteosarcoma.

K7M2 wt-Luc zachowuje właściwości biologiczne i immunologiczne macierzystej linii K7M2, w tym ekspresję składnika dopełniacza C3 oraz receptora Fc gamma I (FcgRI) – cechy, które mogą wpływać na interakcje z układem odporności wrodzonej. Reporter lucyferazy znacznie zwiększa elastyczność eksperymentalną i czułość śledzenia progresji nowotworu w czasie rzeczywistym. Przed zastosowaniem na dużą skalę in vivo naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, kinetykę wzrostu oraz zachowanie przerzutowe w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Wodobrzusze
Choroba
Kostniakomięsak myszy
Miejsce przerzutów
Płuco
Zastosowania
Badania nad osteosarcomą; syngeniczny model nowotworowy BALB/c; obrazowanie przerzutów do płuc za pomocą bioluminescencji; ocena leków przeciwnowotworowych i przeciwprzerzutowych; badania nad inhibitorami punktów kontrolnych; badania nad interakcjami z układem odpornościowym wrodzonym (C3, FcgRI); immunoterapia nowotworów kości u dzieci
Synonimy
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Osteoblast
Nowotworotwórczy
Tak

04Identyfikatory

Źródło
K7M2 wt-Luc (numer katalogowy Cytion 305684)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Dopełniacz (C3), wyrażony, receptor Fc, IgG, wysokie powinowactwo I (Fcgr1), wyrażony
Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c
Wiek dawcy
895 dni