Pāriet uz saturu
K7M2 wt-Luc
Audums
Ascīts
Slimība
Peles osteosarkoma
Metastāžu vieta
Plaušas
Sinonīmi
K7M2-WT, K7M2

Dokumenti

K7M2 wt-Luc

Cell line · Preces numurs 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

K7M2 wt-Luc ir peles K7M2 osteosarkomas šūnu līnijas bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskrēsliņa luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā K7M2 šūnu līnija tika izveidota no BALB/c peles ar spontānu osteosarkomu ascīta šķidruma un tai raksturīga osteoblastiska morfoloģija un augsts metastāžu veidošanās potenciāls, jo īpaši plaušās. K7M2 ir viens no nedaudzajiem singēnajiem osteosarkomas modeļiem, kas pieejami BALB/c fonā, tādējādi padarot to par vērtīgu rīku osteosarkomas bioloģijas, audzēja un imūnsistēmas mijiedarbības pētīšanai, kā arī imūnterapijas stratēģiju novērtēšanai imūnkompetentā saimniekorganismā.

Stabila luciferāzes integrācija K7M2 wt-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, neinvazīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), lai novērotu primārā audzēja augšanu un metastāžu izplatību plaušās singēnās BALB/c pelēm. Pēc luciferīna substrāta ievadīšanas izstarotais signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, kas ļauj veikt audzēja implantācijas, metastāžu izplatības un terapeitiskās atbildes garenvirziena novērošanu bez invazīvām procedūrām katrā laika punktā. Tādēļ K7M2 wt-Luc ir īpaši piemērota pirmsklīniskajiem pētījumiem, kuros novērtē pretvēža un pretmetastāžu līdzekļus, kontrolpunktu inhibitorus un kombinētās ārstēšanas stratēģijas osteosarkomā.

K7M2 wt-Luc saglabā vecāku K7M2 līnijas bioloģiskās un imunoloģiskās īpašības, tostarp komplementa komponenta C3 un Fc gamma receptora I (FcgRI) ekspresiju — īpašības, kas var ietekmēt mijiedarbību ar iedzimto imūnsistēmu. Luciferāzes reportera klātbūtne ievērojami palielina eksperimentālo elastīgumu un jutību, ļaujot reāllaikā izsekot audzēja progresijai. Pirms plaša mēroga in vivo izmantošanas pētniekiem ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, augšanas kinētika un metastāzēšanas tendence savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Ascīts
Slimība
Peles osteosarkoma
Metastāžu vieta
Plaušas
Pieteikumi
Osteosarkomas pētījumi; singēniskais BALB/c audzēja modelis; plaušu metastāžu attēlveidošana, izmantojot bioluminiscenci; pretvēža un pretmetastāžu zāļu novērtēšana; kontrolpunktu inhibitoru testēšana; pētījumi par iedzimtas imūnsistēmas mijiedarbību (C3, FcgRI); bērnu kaulu vēža imūnterapija
Sinonīmi
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Osteoblasts
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
K7M2 wt-Luc (Cytion kataloga numurs 305684)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Komplements(C3), izteikts, Fc receptoru, IgG, augsta afinitāte I(Fcgr1), izteikts
Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c
Donora vecums
895 dienas