Skip to content
K7M2 wt-Luc
Tissue
น้ำในช่องท้อง
Disease
มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาในหนู
Metastatic site
ปอด
Synonyms
K7M2-WT, K7M2

Documents

K7M2 wt-Luc

Cell line · Product number 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

K7M2 wt-Luc เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่สร้างขึ้นจากสายพันธุ์เซลล์มะเร็งกระดูก K7M2 ของหนู ซึ่งได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมให้แสดงออกอย่างคงที่ของยีนตัวรายงานลูซิเฟอเรสของหิ่งห้อย สายเซลล์ K7M2 ต้นแบบถูกสร้างขึ้นจากน้ำท้องของมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาที่เกิดขึ้นเองในหนู BALB/c และมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเซลล์สร้างกระดูก (osteoblastic) พร้อมศักยภาพการแพร่กระจายสูง โดยเฉพาะไปยังปอด K7M2 เป็นหนึ่งในแบบจำลองมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาแบบซินเจเนอิก (syngeneic) ไม่กี่ชนิดที่มีอยู่ในพื้นหลัง BALB/c ทำให้มันเป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา การปฏิสัมพันธ์ระหว่างเนื้องอกกับระบบภูมิคุ้มกัน และการประเมินกลยุทธ์การรักษาด้วยภูมิคุ้มกันในโฮสต์ที่มีระบบภูมิคุ้มกันสมบูรณ์

การบูรณาการลูซิเฟอเรสที่เสถียรใน K7M2 wt-Luc ช่วยให้สามารถทำการถ่ายภาพชีวเรืองแสง (BLI) ที่มีความไวและไม่รุกล้ำ เพื่อติดตามการเติบโตของก้อนมะเร็งต้นกำเนิดและการแพร่กระจายไปยังปอดในหนู BALB/c ที่มีสายพันธุ์เดียวกัน หลังจากการให้สารตั้งต้นลูซิเฟอริน สัญญาณที่ปล่อยออกมาจะสัมพันธ์กับจำนวนเซลล์มะเร็งที่ยังมีชีวิต ซึ่งสนับสนุนการติดตามผลแบบต่อเนื่องของการฝังตัวของเนื้องอก การตั้งถิ่นฐานของเซลล์มะเร็งที่แพร่กระจาย และการตอบสนองต่อการรักษา โดยไม่ต้องใช้ขั้นตอนการรุกล้ำในแต่ละช่วงเวลา สิ่งนี้ทำให้ K7M2 wt-Luc เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาในระยะก่อนคลินิกเพื่อประเมินสารต้านเนื้องอกและสารต้านการแพร่กระจายของเนื้องอก, ตัวยับยั้งจุดตรวจสอบ (checkpoint inhibitors), และกลยุทธ์การรักษาแบบผสมผสานในโรคมะเร็งกระดูก (osteosarcoma)

K7M2 wt-Luc ยังคงรักษาคุณสมบัติทางชีววิทยาและภูมิคุ้มกันของสายพันธุ์ K7M2 ต้นแบบไว้ รวมถึงการแสดงออกของส่วนประกอบคอมพลีเมนต์ C3 และตัวรับ Fc gamma I (FcgRI) ซึ่งเป็นคุณสมบัติที่อาจส่งผลต่อการปฏิสัมพันธ์กับระบบภูมิคุ้มกันแบบธรรมชาติ ตัวรายงานลูซิเฟอเรสช่วยเพิ่มความยืดหยุ่นและความไวในการทดลองอย่างมีนัยสำคัญ สำหรับการติดตามความก้าวหน้าของเนื้องอกแบบเรียลไทม์ นักวิจัยควรตรวจสอบความถูกต้องของกิจกรรมลูซิเฟอเรส อัตราการเติบโต และพฤติกรรมการแพร่กระจายของมะเร็งภายใต้เงื่อนไขการทดลองเฉพาะของตนเอง ก่อนที่จะนำไปใช้ในสัตว์ทดลองใน vivo ในระดับใหญ่

Tissue
น้ำในช่องท้อง
Disease
มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาในหนู
Metastatic site
ปอด
Applications
การวิจัยเกี่ยวกับมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา; แบบจำลองเนื้องอก BALB/c แบบซินเจเนอิก; การถ่ายภาพการแพร่กระจายไปยังปอดโดยใช้แสงชีวภาพ; การประเมินประสิทธิภาพของยาต้านเนื้องอกและยาต้านการแพร่กระจาย; การทดสอบสารยับยั้งจุดตรวจสอบภูมิคุ้มกัน; การศึกษาปฏิสัมพันธ์ของระบบภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด (C3, FcgRI); การรักษาด้วยภูมิคุ้มกันสำหรับมะเร็งกระดูกในเด็ก
Synonyms
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
ออสทีโอบลาสต์
Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
K7M2 wt-Luc (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305684)
NCBI TaxID
10090

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
คอมเพล็กซ์คอมเพล็กซ์ (C3), แสดงออก, ตัวรับ Fc, IgG, ความสัมพันธ์สูง I(Fcgr1), แสดงออก
Antigen expression
Luc2 (ไฟลั๊ก, โคดอน-ออปติไมซ์)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
1–3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
895 วัน